活体状况中,可能还有其它酶活性来帮助调整DNA的拓扑学性质。 37℃时,RNA聚合酶的聚合速度可达40-100个核苷酸秒 2、真核生物RNA聚合酶 真核生物的转录机制要复杂得多,有三种细胞核内的RNA聚合酶:RNA聚合酶I转录RNA,RNA聚 合酶Ⅱ转录mRNA,RNA聚合酶Ⅲ转录tRNA和其它小分子RNA。这三种RNA聚合酶分子量都在50万 左右,亚基数分别为6-15。 P362表20-3真核生物RNA聚合酶的分类、分布及各自的功能 动物、植物、昆虫等不同来源的细胞, RNApolⅡ的活性都可被低浓度的α-鹅膏蕈碱抑制,而 RNApol Ⅰ不受抑制。 动物 RNApol受高浓度的α鹅膏蕈碱抑制,而酵母、昆虫的 RNApoll不受抑制。 除了细胞核RNA聚合酶外,还分离到践线粒体和叶绿体RNA聚合酶,它们的结构简单,能转录所有种类 的RNA,类似于细菌RNA聚合酶 3、噬菌体T3和Ⅳ7编码的RNA聚合酶 仅为一条分子量IKD的多肽链,这些聚合酶只需要识别噬菌体DNA的少数启动子,并无选择地与其 作用,37℃时的聚合速度200mt秒 、RNA聚合酶催化的转录过程(Eco) P361图202 1、起始 RNA聚合酶结合到DNA双链的特定部位,局部解开双螺旋,第一个核苷酸掺λ转录起始位点,从此开 始RNA链的延伸 在新合成的RNA链的5未端,通常为带有三个磷酸基团的鸟苷或腺苷(pG或ppA),即合成的第 个底物是GIP或ATP。 起始过程中,σ因子起关键作用,它能使聚合酶迅速地与DNA的启动子结合,σ亚基与β'结合时,β 亚基的构象有利于核心酶与启动子紧密结合,。 正链:与mRNA序列相同的两、链。 负链:模板链。 转录起点是+1,上游是-1 2、延长 转录起始后,σ亚基释放,离开核心酶,使核心酶的βˆ亚基构象变化,与DNA模板亲和力下降,在 DNA上移动速度加快,使RNA链不断延长 转录起始后,σ亚基便从全酶中解离出来,然后nsA亚基结合到核心酶上,由nsA亚基识别序列序列３ 活体状况中，可能还有其它酶活性来帮助调整DNA的拓扑学性质。 37℃时，RNA聚合酶的聚合速度可达40~100 个核苷酸/秒 2、 真核生物RNA聚合酶 真核生物的转录机制要复杂得多，有三种细胞核内的RNA 聚合酶：RNA 聚合酶I 转录 rRNA，RNA 聚 合酶II 转录 mRNA，RNA聚合酶 III 转录tRNA和其它小分子 RNA。这三种 RNA 聚合酶分子量都在 50 万 左右，亚基数分别为6-15。 P362 表 20-3 真核生物RNA聚合酶的分类、分布及各自的功能 动物、植物、昆虫等不同来源的细胞，RNApolⅡ的活性都可被低浓度的α-鹅膏蕈碱抑制，而 RNApol Ⅰ不受抑制。 动物 RNApolⅢ受高浓度的α-鹅膏蕈碱抑制，而酵母、昆虫的 RNApolⅢ不受抑制。 除了细胞核 RNA 聚合酶外，还分离到线粒体和叶绿体 RNA聚合酶，它们的结构简单，能转录所有种类 的 RNA，类似于细菌RNA聚合酶。 3、 噬菌体 T3和 T7 编码的RNA聚合酶 仅为一条分子量 11KD 的多肽链，这些聚合酶只需要识别噬菌体 DNA 的少数启动子，并无选择地与其 作用，37℃时的聚合速度200nt/秒。 二、 RNA 聚合酶催化的转录过程（E.coli） P361 图 20-2 1、 起始 RNA 聚合酶结合到DNA双链的特定部位，局部解开双螺旋，第一个核苷酸掺入转录起始位点，从此开 始 RNA链的延伸。 在新合成的 RNA 链的 5’末端，通常为带有三个磷酸基团的鸟苷或腺苷（pppG 或 pppA），即合成的第一 个底物是 GTP 或ATP。 起始过程中，σ因子起关键作用，它能使聚合酶迅速地与DNA的启动子结合，σ亚基与β’结合时，β’ 亚基的构象有利于核心酶与启动子紧密结合，。 正链：与 mRNA序列相同的两、链。 负链：模板链。 转录起点是+1，上游是-1。 2、 延长 转录起始后，σ亚基释放，离开核心酶，使核心酶的β’亚基构象变化，与 DNA 模板亲和力下降，在 DNA 上移动速度加快，使RNA链不断延长。 转录起始后，σ亚基便从全酶中解离出来，然后 nusA亚基结合到核心酶上，由 nusA 亚基识别序列序列