(2)辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体的原理 a. 辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP ) HRP广泛分布于植物界,它是由无色的酶蛋白和棕色 的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多个同 功酶组成,分子量为40,000,等电点为pH3~9,酶催化的最 适PH因供氢体不同而稍有差异,但多在pH5左右。酶溶于 水和58%以下的硫酸铵溶液。HRP的辅基和酶蛋白最大吸 收光谱分别为403nm和275nm,一般以OD403nm / OD275nm的比值RZ(德文Reinheit Zahl)表示酶的纯度。 HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2 )和供氢体 (DH2 )。供氢体多为无色的还原型染料,通过反应可生成有 色的氧化型染料(D)。 HRP DH2+H2O2────→D+2H2O(2)辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体的原理 a. 辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP ) HRP广泛分布于植物界,它是由无色的酶蛋白和棕色 的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多个同 功酶组成,分子量为40,000,等电点为pH3~9,酶催化的最 适PH因供氢体不同而稍有差异,但多在pH5左右。酶溶于 水和58%以下的硫酸铵溶液。HRP的辅基和酶蛋白最大吸 收光谱分别为403nm和275nm,一般以OD403nm / OD275nm的比值RZ(德文Reinheit Zahl)表示酶的纯度。 HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2 )和供氢体 (DH2 )。供氢体多为无色的还原型染料,通过反应可生成有 色的氧化型染料(D)。 HRP DH2+H2O2────→D+2H2O