5、脱氧核糖核酸酶(DNase I)。 第三章基因工程载体 (一)教学目的与要求 了解常用的选择标记基因，质粒DNA的电泳特征，常用质粒载体的大小、抗性标记及用途：掌握 质粒的概念，质粒DNA的提取方法，大肠杆菌感受态细胞的制备及转化方法，双元载体系统中植物 表达载体构建的方法，农杆菌感受态细胞的制备及转化方法。 (二)教学的重点与难点分析 重点：质粒的概念，常用的选择标记基因，质粒DNA的电泳特征，常用质粒载体的大小、抗性 标记及用途，质粒DNA的提取方法，大肠杆菌感受态细胞的制备及转化方法，双元载体系统中植物 表达载体构建的方法，农杆菌感受态细胞的制备及转化方法。 难点：质粒的复制、不相溶性，质粒载体的图谱及多克隆位点(MCS)的应用，根癌农杆菌T1 质粒的结构，T-DNA质粒的改造的策略，病毒载体系统的选择策略，病毒载体系统在植物基因工程中 的应用。 (三)教学内容 第一节质粒载体 1、质粒的概念和基本特性 2、常用的质粒载体 1)pSC101和ColE1: 2)pBR322: 3)pUC18和pUC19: 4)pUC118和pUC119: 5)pBluescript M13+pBluescript M13-: 6)pSP64和pSP65: 7)pGEM-3Z、pUCm-T。 3、质粒DNA的提取 1)质粒DNA的小量制备（碱裂解法）： 2)质粒DNA的大量制备（碱裂解法）。 4、大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 1)氯化钙法： 2)电转化法。 第二节表达载体 1、质粒表达载体 1)Ti质粒载体： 2)Ri质粒载体系统。 2、病毒载体 1)病毒载体系统的基本条件： 2)病毒载体系统的选择策略： 3)病毒载体与质粒载体的比较及应用潜力。5、脱氧核糖核酸酶（DNase I）。 第三章 基因工程载体 （一）教学目的与要求 了解常用的选择标记基因，质粒 DNA 的电泳特征，常用质粒载体的大小、抗性标记及用途；掌握 质粒的概念，质粒 DNA 的提取方法，大肠杆菌感受态细胞的制备及转化方法，双元载体系统中植物 表达载体构建的方法，农杆菌感受态细胞的制备及转化方法。。 （二）教学的重点与难点分析 重点：质粒的概念，常用的选择标记基因，质粒 DNA 的电泳特征，常用质粒载体的大小、抗性 标记及用途，质粒 DNA 的提取方法，大肠杆菌感受态细胞的制备及转化方法，双元载体系统中植物 表达载体构建的方法，农杆菌感受态细胞的制备及转化方法。 难点：质粒的复制、不相溶性，质粒载体的图谱及多克隆位点（MCS）的应用，根癌农杆菌 Ti 质粒的结构，T-DNA 质粒的改造的策略，病毒载体系统的选择策略，病毒载体系统在植物基因工程中 的应用。 （三）教学内容 第一节 质粒载体 1、质粒的概念和基本特性 2、常用的质粒载体 1）pSC101 和 ColE1； 2）pBR322； 3）pUC18 和 pUC19； 4）pUC118 和 pUC119； 5）pBluescript M13+和 pBluescript M13-； 6）pSP64 和 pSP65； 7）pGEM-3Z、pUCm-T。 3、质粒 DNA 的提取 1）质粒 DNA 的小量制备（碱裂解法）； 2）质粒 DNA 的大量制备（碱裂解法）。 4、大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 1）氯化钙法； 2）电转化法。 第二节 表达载体 1、质粒表达载体 1）Ti 质粒载体； 2）Ri 质粒载体系统。 2、病毒载体 1）病毒载体系统的基本条件； 2）病毒载体系统的选择策略； 3）病毒载体与质粒载体的比较及应用潜力