3、限制性核酸内切酶的命名原则: 4、限制性核酸内切酶的基本特性: 5、限制内切核酸酶活性的检测方法: 6、影响限制性内切酶的活性因素: 7、酶反应的终止: 8、识别位点在DNA分子中的频率: 9、限制性内切酶的应用。 第三节DNA连接酶 1、DNA连接酶的概念: 2、DNA片段的连接:相同粘性末端的连接、平末端的连接、不匹配的粘端连接、同聚物加 尾连接、衔接物连接法、DNA接头连接、粘性末端的更换: 3、影响连接反应的因素: 4、重组率。 第四节DNA聚合酶 1、DNA聚合酶概述: 2、大肠杆菌DNA聚合酶I: 3、大肠杆菌DNA聚合酶I大片段(K1enow酶): 4、T4DNA聚合酶(T4 DNA polymerase): 5、T7DNA聚合酶(T7 DNA polymerase)及测序酶: 6、Taq DNA聚合酶(Taq DNA polymerase): 7、Amv反转录酶(Amv reverse transcriptase)。 第五节DNA甲基化酶 1、生物体内DNA的甲基化现象: 2、DNA甲基化酶的种类:dam甲基化酶、dcm甲基化酶: 3、限制修饰系统I、II、III型中的甲基化酶: 4、I型甲基化酶对限制酶活性的影响: 5、甲基化酶的用途: 6、DNA甲基化研究的实例。 第六节DNA及RNA的修饰酶 1、末端转移酶: 2、T4多聚核苷酸激酶: 3、碱性磷酸酶: 4、拓扑异构酶。 第七节核酸酶 1、核酸外切酶(Exonucleases): 2、S1核酸酶: 3、Bal31核酸酶: 4、核糖核酸酶(RNase A or T):3、限制性核酸内切酶的命名原则; 4、限制性核酸内切酶的基本特性; 5、限制内切核酸酶活性的检测方法; 6、影响限制性内切酶的活性因素; 7、酶反应的终止; 8、识别位点在 DNA 分子中的频率; 9、限制性内切酶的应用。 第三节 DNA 连接酶 1、DNA 连接酶的概念; 2、DNA 片段的连接:相同粘性末端的连接、平末端的连接、不匹配的粘端连接、同聚物加 尾连接、衔接物连接法、DNA 接头连接、粘性末端的更换; 3、影响连接反应的因素; 4、重组率。 第四节 DNA 聚合酶 1、DNA 聚合酶概述; 2、大肠杆菌 DNA 聚合酶 I; 3、大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 大片段(Klenow 酶); 4、T4 DNA 聚合酶(T4 DNA polymerase); 5、T7 DNA 聚合酶(T7 DNA polymerase)及测序酶; 6、Taq DNA 聚合酶(Taq DNA polymerase); 7、Amv 反转录酶(Amv reverse transcriptase)。 第五节 DNA 甲基化酶 1、生物体内 DNA 的甲基化现象; 2、DNA 甲基化酶的种类:dam 甲基化酶、dcm 甲基化酶; 3、限制修饰系统 I、II、III 型中的甲基化酶; 4、I 型甲基化酶对限制酶活性的影响; 5、甲基化酶的用途; 6、DNA 甲基化研究的实例。 第六节 DNA 及 RNA 的修饰酶 1、末端转移酶; 2、T4 多聚核苷酸激酶; 3、碱性磷酸酶; 4、拓扑异构酶。 第七节 核酸酶 1、核酸外切酶(Exonucleases); 2、S1 核酸酶; 3、Bal 31 核酸酶; 4、核糖核酸酶(RNase A or T);