难点:基因工程诞生的理论基础。 (三)教学内容: 第一节基因工程的概念 1、基因工程的概念: 2、基因工程的四要素: 3、基因工程分类。 第二节基因工程的诞生和发展 1、DNA遗传功能的阐明: 2、基因工程的诞生:理论基础、技术基础: 3、基因工程的建立: 4、基因工程的成熟与腾飞。 第三节基因工程的研究内容 第四节基因工程的应用 1、基因工程的应用领域: 2、基因工程取得的成就: 第二章基因工程的酶学基础 (一)教学目的与要求 了解常用工具酶的种类、星号活性、影响限制性内切酶活性的因素:掌握工具酶定义、限制性核 酸内切酶的命名原则、同尾酶(Isocaudamers)、同裂酶(Isoschizomers)、DNA聚合酶、DNA连接 酶的概念、DNA连接酶的种类、影响连接反应的因素:熟悉限制性核酸内切酶的识别序列特点、II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点、II型限制性内切酶的切割方式、DNA片段连接的各种方法: 使学生具有使用分子生物学软件DNAClub的能力、具有将任意DNA分子连接的分析和应用能力、具 有在分子克隆研究中,灵活应用各种DNA聚合酶的能力。 (二)教学的重点与难点分析 重点:工具酶、同尾酶、同裂酶的概念,II型限制性核酸内切酶的识别序列特点,影响限制性 内切酶活性的因素,酶反应的终止方法,DNA连接酶的种类及应用,DNA片段连接的各种方法,大肠 杆菌DNA聚合酶I、Klenow酶、Taq DNA聚合酶、Amv反转录酶的特点及其在分子克隆中的应用,DNA 甲基化酶的种类及用途,碱性磷酸酶的种类及应用,核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶的种类及应用。 难点:宿主控制的限制与修饰作用,II型限制性内切酶的识别序列与切割方式的相关性,DA 甲基化作用对限制性内切酶的影响,不匹配的粘端连接,衔接物连接法,DNA接头连接,粘性末端的 更换,T4DNA聚合酶、T7DNA聚合酶和测序酶的使用。 (三)教学内容 第一节概述 1、工具酶定义: 2、常用的工具酶。 第二节限制性核酸内切酶 1、限制性核酸内切酶的发现与分类 2、限制性核酸内切酶的识别序列特点:难点:基因工程诞生的理论基础。 (三)教学内容: 第一节 基因工程的概念 1、基因工程的概念; 2、基因工程的四要素; 3、基因工程分类。 第二节 基因工程的诞生和发展 1、DNA 遗传功能的阐明; 2、基因工程的诞生:理论基础、技术基础; 3、基因工程的建立; 4、基因工程的成熟与腾飞。 第三节 基因工程的研究内容 第四节 基因工程的应用 1、基因工程的应用领域; 2、基因工程取得的成就。 第二章 基因工程的酶学基础 (一)教学目的与要求 了解常用工具酶的种类、星号活性、影响限制性内切酶活性的因素;掌握工具酶定义、限制性核 酸内切酶的命名原则、同尾酶(Isocaudamers)、同裂酶(Isoschizomers)、DNA 聚合酶、DNA 连接 酶的概念、DNA 连接酶的种类、影响连接反应的因素;熟悉限制性核酸内切酶的识别序列特点、II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点、II 型限制性内切酶的切割方式、DNA 片段连接的各种方法; 使学生具有使用分子生物学软件 DNAClub 的能力、具有将任意 DNA 分子连接的分析和应用能力、具 有在分子克隆研究中,灵活应用各种 DNA 聚合酶的能力。 (二)教学的重点与难点分析 重点:工具酶、同尾酶、同裂酶的概念,II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点,影响限制性 内切酶活性的因素,酶反应的终止方法,DNA 连接酶的种类及应用,DNA 片段连接的各种方法,大肠 杆菌 DNA 聚合酶 I、Klenow 酶、Taq DNA 聚合酶、Amv 反转录酶的特点及其在分子克隆中的应用,DNA 甲基化酶的种类及用途,碱性磷酸酶的种类及应用,核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶的种类及应用。 难点:宿主控制的限制与修饰作用,II 型限制性内切酶的识别序列与切割方式的相关性,DNA 甲基化作用对限制性内切酶的影响,不匹配的粘端连接,衔接物连接法,DNA 接头连接,粘性末端的 更换,T4 DNA 聚合酶、T7 DNA 聚合酶和测序酶的使用。 (三)教学内容 第一节 概述 1、工具酶定义; 2、常用的工具酶。 第二节 限制性核酸内切酶 1、限制性核酸内切酶的发现与分类 2、限制性核酸内切酶的识别序列特点;