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②复消色差物镜物镜外壳上标有“Apo”字样,除能校正红、蓝、绿三色光的色差外 还能校正黄色光造成的相差,通常与补偿目镜配合使用 ③特种物镜在上述物镜基础上,为达到某些特定观察效果而制造的物镜。如:带校正 环物镜,带视场光阑物镜,相差物镜,荧光物镜,无应变物镜,无罩物镜,长工作距离物镜等 目前在研究中常用的物镜还有:半复消色差物镜(FL),平场物镜(Plan),平场复消色差物镜(Plan Apo),超平场物镜( Splan,超平场复消色差物镜( Splan apo)等。 4)目镜目镜的作用是把物镜放大了的实像再放大一次,并把物像映入观察者的眼中。目镜 的结构较物镜简单,普通光学显微镜的目镜通常由两块透镜组成,上端的一块透镜称“接目镜” 下端的透镜称“场镜”。上下透镜之间或在两个透镜的下方,装有由金属制的环状光阑或叫“视 场光阑”,物镜放大后的中间像就落在视场光阑平面处,所以其上可安置目镜测微尺。 普通光学显微镜常用的目镜为惠更斯目镜( Huy gens eyepiece),如要进行研究用时, 般选用性能更好的目镜,如补偿目镜(K)、平场目镜(P)、广视场目镜(WF)。照相时选用照 相目镜(NFK) (二)光学显微镜的成像原理 显微镜的放大是通过透镜来完成的,单透镜成像具有像差,影响像质。由单透镜组合而成的透镜 组相当于一个凸透镜,放大作用更好 三)显微镜的性能 显微镜分辨能力的高低决定于光学系统的各种条件。被观察的物体必须放大率高,而且清 晰,物体放大后,能否呈现清晰的细微结构,首先取决于物镜的性能,其次为目镜和聚光 镜的性能 1、数值孔径也叫做镜口率(或开口率),简写为NA,在物镜和聚光器上都标有它们的数 值孔径,数值孔径是物镜和聚光器的主要参数,也是判断它们性能的最重要指标。数值孔 径和显微镜的各种性能有密切的关系,它与显微镜的分辨力成正比,与焦深成反比,与镜 象亮度的平方根成正比。 数值孔径可用下式表示: N. A=n. sin 式中: n—物镜与标本之间的介质析射率 a—物镜的镜口角 所谓镜口角是指从物镜光轴上的物点发出的光线与物镜前透镜有效直径的边缘所张的角 镜口角a总是小于180°。因为空气的折射率为1,所以干燥物镜的数值孔径总是小于1, 一般为0.05—0.95:油浸物镜如用香柏油(折射率为1.515)浸没,则数值孔径最大可接近1.5。 虽然理论上数值孔径的极限等于所用浸没介质的折射率,但实际上从透镜的制造技术看,是不可 能达到这一极限的。通常在实用范围内,高级油浸物镜的最大数值孔径是1.4 几种物质的介质的折射率如下: 空气为1.0,水为1.33,玻璃为1.5,甘油为1.47,香柏油为1.52。 介质折射率对物镜光线通路的影响见图1-6 2、分辨力 可用下式表示 可见光的波长为0.4-0.7微米,平均波长为0.55微米。若用数值孔为0.65的物镜,则 D=0.55微米/2×0.65=0.42微米。这表示被检物体在0.42微米以上时可被观察到,若小于0.42②复消色差物镜 物镜外壳上标有“Apo”字样,除能校正红、蓝、绿三色光的色差外, 还能校正黄色光造成的相差,通常与补偿目镜配合使用。 ③特种物镜 在上述物镜基础上,为达到某些特定观察效果而制造的物镜。如:带校正 环物镜,带视场光阑物镜,相差物镜,荧光物镜,无应变物镜,无罩物镜,长工作距离物镜等。 目前在研究中常用的物镜还有:半复消色差物镜(FL),平场物镜(Plan),平场复消色差物镜(Plan Apo),超平场物镜(Splan,超平场复消色差物镜(Splan Apo)等。 (4)目镜 目镜的作用是把物镜放大了的实像再放大一次,并把物像映入观察者的眼中。目镜 的结构较物镜简单,普通光学显微镜的目镜通常由两块透镜组成,上端的一块透镜称“接目镜”, 下端的透镜称“场镜”。上下透镜之间或在两个透镜的下方,装有由金属制的环状光阑或叫“视 场光阑”,物镜放大后的中间像就落在视场光阑平面处,所以其上可安置目镜测微尺。 普通光学显微镜常用的目镜为惠更斯目镜(Huygens eyepiece),如要进行研究用时,一 般选用性能更好的目镜,如补偿目镜(K)、平场目镜(P)、广视场目镜(WF)。照相时选用照 相目镜(NFK)。 (二)光学显微镜的成像原理 显微镜的放大是通过透镜来完成的,单透镜成像具有像差,影响像质。由单透镜组合而成的透镜 组相当于一个凸透镜,放大作用更好。 (三)显微镜的性能 显微镜分辨能力的高低决定于光学系统的各种条件。被观察的物体必须放大率高,而且清 晰,物体放大后,能否呈现清晰的细微结构,首先取决于物镜的性能,其次为目镜和聚光 镜的性能。 1、数值孔径 也叫做镜口率(或开口率),简写为 N.A,在物镜和聚光器上都标有它们的数 值孔径,数值孔径是物镜和聚光器的主要参数,也是判断它们性能的最重要指标。数值孔 径和显微镜的各种性能有密切的关系,它与显微镜的分辨力成正比,与焦深成反比,与镜 象亮度的平方根成正比。 数值孔径可用下式表示: N.A=n.sin α 2 式中: n—物镜与标本之间的介质析射率 α—物镜的镜口角 所谓镜口角是指从物镜光轴上的物点发出的光线与物镜前透镜有效直径的边缘所张的角 度,。 镜口角α总是小于 180°。因为空气的折射率为 1,所以干燥物镜的数值孔径总是小于 1, 一般为 0.05—0.95;油浸物镜如用香柏油(折射率为 1.515)浸没,则数值孔径最大可接近 1.5。 虽然理论上数值孔径的极限等于所用浸没介质的折射率,但实际上从透镜的制造技术看,是不可 能达到这一极限的。通常在实用范围内,高级油浸物镜的最大数值孔径是 1.4。 几种物质的介质的折射率如下: 空气为 1.0,水为 1.33,玻璃为 1.5,甘油为 1.47,香柏油为 1.52。 介质折射率对物镜光线通路的影响见图 1—6。 2、分辨力 D 可用下式表示: D=λ/2N.A. 可见光的波长为 0.4—0.7 微米,平均波长为 0.55 微米。若用数值孔为 0.65 的物镜,则 D=0.55 微米/2×0.65=0.42 微米。这表示被检物体在 0.42 微米以上时可被观察到,若小于 0.42
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