5.(1)用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶切割含有目的基因的DNA和质粒，使其 产生相同末端。 (2)将切下的目的基因片段与切开的质粒混合，再加入适量DNA连接醇，使目的基因插入 质粒的切口处，形成一个重组DNA分子（重组质粒）。 二、1.农杆菌转化法花粉管通道法显微注射法C2*处理法 2能。可从双子叶植物中提取该化合物，再用该化合物处理单子叶植物细胞，然后就可用 农杆菌转化法将目的基因导入单子叶植物细胞。 核心素养专练 1.C 2.D【解析】PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，其原理是 DNA双链复制，A、B正确：利用PCR技术获取目的基国的前提是要有一段已知目的基国的核 苷酸序列，以便报据这一序列合成引物，C正确：PCR扩增中目的基国受热变性后解聚为单链， 不需要解旋酶解开双链DNAD错误 4B【解析】基因表达载体的构建是基因工程的核心内容，基因表达载体是载体的一种 除了目的基因外，它还有启动子、终止子和标记基因等，①错误；启动子是RNA聚合酶的结合 位点有了它才能驱动基国转录出RNA②正确：终止子控制着转录的结束③正确：由于受体 细验右植物。 动扬以及生扬之以及目的共因柴入体知的方法不同因此共国表达 体的构建是不完全相同的， ④错误：基国表这 载体 须在细跑外 进行，⑤错误 ②③正确 ①④⑤错误。故连B。 5D【解析】目的基国导入受体细胞前必须进行基国表达载体的构建，不能直接将目的 基因导入，A错误：酵母菌细胞中有多种细胞器，作为受体细胞生产胰岛素（分沈蛋白）比大肠杆 菌更有优券，B错误：大肠杆菌作为受体细胞时应使用C透行处理，C错误可以利用部分病 毒将自身DA整合到宿主细胞染色体上的特点枸建病毒表达载体，并通过病毒的侵染将 的基因学入相关受体细胞D正确 6.A【解析】水稻的花很小，不适合用花粉管通道法导入目的基国，A错误；将目的基因 导入动物细胞常用显微注射法，B正：将目的基因导入微生物细胞最常用的方法是用C+处 理大肠杆菌使其处于一种能吸收思围环境中DNA分子的状态C正确：将目的基因呈入挂积 的景常用的方法是农杆菌转化法此外还有基因检法和莎粉蒲道法门正确】 zc" 【解析】 由意可知，该同学的目的是得到放射性标记T为末端的 不同长度的 DNA子链片段，必须提供四种dNP,如果没有dTIP则所有片段长度均一致，因为所有子链在 合成时均在第一个T处将入双脱氧的T而停止复制，故选②。由题图可知，ddTIP要作为DNA 复制的原料则需要脱去两个磷酸基团故应将放射性2P标记于口位故选③。C正确。 8A【解折】检测目的燕因是否成功异入或表达的方法有多种。①分子水平上的检测则 通过PCR等技术检测转基国生物的DNA上是否插入了目的基因或检测目的 基因是否转录 出了mRNA检测目的基国是否翻译成蛋白质用抗原 一抗体杂交技术。②个体生物学水平的 鉴定：检测是否具有抗性及抗性程度：检测基因工程产品与天然产品的活性是否相同。在显徽 镜下无法观察到受体细胞中是否含有目的基因。故选A」 9AD【解析】过程①是以mRNA为膜板合成DNA的过程即逆转录过程需要使用的 原料是4种游离的脱氧核糖核苷酸，A正确过程②表示利用PCR技术，扩增目的基国，在此过 程中，不需要解旋酶，是道过拉制温 未达到解的日的，B错误：利用氯化钙处理大肠杆菌，伙 之成为感受态细胞.C错误：检目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA上，可以采用 PCR技术D正确。5.(1)用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶切割含有目的基因的 DNA 和质粒,使其 产生相同末端。 (2)将切下的目的基因片段与切开的质粒混合,再加入适量 DNA 连接酶,使目的基因插入 质粒的切口处,形成一个重组 DNA 分子(重组质粒)。 二、1.农杆菌转化法 花粉管通道法 显微注射法 Ca2+处理法 2.能。可从双子叶植物中提取该化合物,再用该化合物处理单子叶植物细胞,然后就可用 农杆菌转化法将目的基因导入单子叶植物细胞。 核心素养专练 1.C 2.D 【解析】PCR 是一项在生物体外复制特定的 DNA 片段的核酸合成技术,其原理是 DNA 双链复制,A、B 正确;利用 PCR 技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核 苷酸序列,以便根据这一序列合成引物,C 正确;PCR 扩增中目的基因受热变性后解聚为单链, 不需要解旋酶解开双链 DNA,D 错误。 3.B 4.B 【解析】基因表达载体的构建是基因工程的核心内容,基因表达载体是载体的一种, 除了目的基因外,它还有启动子、终止子和标记基因等,①错误;启动子是 RNA 聚合酶的结合 位点,有了它才能驱动基因转录出 mRNA,②正确;终止子控制着转录的结束,③正确;由于受体 细胞有植物、动物以及微生物之分,以及目的基因导入受体细胞的方法不同,因此基因表达载 体的构建是不完全相同的,④错误;基因表达载体的构建必须在细胞外进行,⑤错误。②③正确, ①④⑤错误。故选 B。 5.D 【解析】目的基因导入受体细胞前必须进行基因表达载体的构建,不能直接将目的 基因导入,A 错误;酵母菌细胞中有多种细胞器,作为受体细胞生产胰岛素(分泌蛋白)比大肠杆 菌更有优势,B 错误;大肠杆菌作为受体细胞时应使用 Ca2+进行处理,C 错误;可以利用部分病 毒将自身 DNA 整合到宿主细胞染色体上的特点构建病毒表达载体,并通过病毒的侵染将目 的基因导入相关受体细胞,D 正确。 6.A 【解析】水稻的花很小,不适合用花粉管通道法导入目的基因,A 错误;将目的基因 导入动物细胞常用显微注射法,B 正确;将目的基因导入微生物细胞最常用的方法是用 Ca2+处 理大肠杆菌,使其处于一种能吸收周围环境中 DNA 分子的状态,C 正确;将目的基因导入植物 细胞最常用的方法是农杆菌转化法,此外还有基因枪法和花粉管通道法,D 正确。 7.C 【解析】由题意可知,该同学的目的是得到放射性标记 T 为末端的、不同长度的 DNA 子链片段,必须提供四种 dNTP,如果没有 dTTP 则所有片段长度均一致,因为所有子链在 合成时均在第一个 T 处掺入双脱氧的 T 而停止复制,故选②。由题图可知,ddTTP 要作为 DNA 复制的原料则需要脱去两个磷酸基团,故应将放射性 32P 标记于 α 位,故选③。C 正确。 8.A 【解析】检测目的基因是否成功导入或表达的方法有多种。①分子水平上的检测: 通过 PCR 等技术检测转基因生物的 DNA 上是否插入了目的基因或检测目的基因是否转录 出了 mRNA;检测目的基因是否翻译成蛋白质用抗原—抗体杂交技术。②个体生物学水平的 鉴定:检测是否具有抗性及抗性程度;检测基因工程产品与天然产品的活性是否相同。在显微 镜下无法观察到受体细胞中是否含有目的基因。故选 A。 9.AD 【解析】过程①是以 mRNA 为模板合成 DNA 的过程,即逆转录过程,需要使用的 原料是 4 种游离的脱氧核糖核苷酸,A 正确;过程②表示利用 PCR 技术,扩增目的基因,在此过 程中,不需要解旋酶,是通过控制温度来达到解旋的目的,B 错误;利用氯化钙处理大肠杆菌,使 之成为感受态细胞,C 错误;检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体 DNA 上,可以采用 PCR 技术,D 正确