I0.ABC【解析】构建基因表达载体需要限制性内切核酸酶和DNA连接酶，故A项错 混：③侵染植物细的后重组T盾粒上的TDNA不是林合到受体细的的炎色体上五是校合到 受体细胞染色体的DNA分子上，故B项错误：染色体DNA上合有目的基因，但目的基因色司 能不能转素或者不能翻译，或者表达的白质不具有生物活性，故℃项错误：若植株表现出 虫性状说明目的基因成功导入受体细胞并成功表达，该过程中发生了基因重组为可道传变 异故D项正确。 11ABD【解析】由于装因的选择性表法在人的肝细胞中没有號岛素其因转录的 mRN 休的复制启动于复制原（起）点，胰岛素基因的表达启动于启动 作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛远出来，C正确：启 动子在胰岛素基因的翻译过程中起作用，终止子在胰岛素基国的翻译过程中起作用，D错误。 12.(1)解旋酶加热至9095℃氢键 名A费合热定性商面大品任商D4聚合膨在商温下会失 识别并切割 同的碱基序列 T4DNA连接酶(2)编码蛋白质的基因启动子RNA聚合薛(3)Ca2(CaC,溶液)用于 鉴定和箭选导入了基因表达载体的农杆菌(4)PCR 14.(1)限制性内切核酸（或限制核苷酸序列 (2)磷酸二酯键DNA单链以DNA为模板的DNA链的延伸(B②④(4B 【解析】(I)根据题图可知，步骤I是获取目的DNA片役，所用的酶EcoR I是一种限制 酶，其能识别特定的核苷酸序列，并使每一条链中 特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯健 开。(2)步骤I是将目的DNA片段连接成环状，其中DNA连接酶的作用是催化相邻核苷酸 间的3羟基和5磷酸间形成磷酸二酯健。PC℉循环中，升高温度到95℃是为了打开氢健使 双链解旋获得DNA单链T0DNA聚合酶的作用是催化游离的脱兼核苷酸连接到引物3瑞 合成DNA子链。(3)引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3Y端开始延仲DNA子链.国 为DNA的合成方向总是从子链的5璃向3端延仲，故为扩增术知序列，选择的与模板链相结合 的引物应为5.TCATGAGCGCATAGTT-3(引物④)和5.GCAATGCGTAGCCTCT-3(引物②). (4)分析题意可知，片段F的两端为限制酶ECOR【切割后产生的黏性末端国此其5'端序列应 为AATT-3端序列应为-TTAA.B正确。 学案设计（二） ■■■学习目标 1.阐明基因工程的原理和基本操作程序。 2针对人类生产或生活中的某一需求，选取适当的基因工程的技术和方法，尝试设计获得 某一转基因产品的方案。 3.尝试进行PCR的基本操作并用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR的产物。 ■■■自主预习 第一步目的基因的筛选与获取 一、阅读教材76页相关内容，回答下列问题： 1.什么是目的基因，举例说明？ 10.ABC 【解析】构建基因表达载体需要限制性内切核酸酶和 DNA 连接酶,故 A 项错 误;③侵染植物细胞后,重组 Ti 质粒上的 T-DNA 不是整合到受体细胞的染色体上,而是整合到 受体细胞染色体的 DNA 分子上,故 B 项错误;染色体 DNA 上含有目的基因,但目的基因也可 能不能转录或者不能翻译,或者表达的蛋白质不具有生物活性,故 C 项错误;若植株表现出抗 虫性状,说明目的基因成功导入受体细胞并成功表达,该过程中发生了基因重组,为可遗传变 异,故 D 项正确。 11.ABD 【解析】由于基因的选择性表达,在人的肝细胞中没有胰岛素基因转录的 mRNA,所以基因表达载体中的胰岛素基因不能通过人肝细胞 mRNA 逆转录获得,A 错误;基 因表达载体的复制启动于复制原(起)点,胰岛素基因的表达启动于启动子,B 错误;标记基因的 作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来,C 正确;启 动子在胰岛素基因的翻译过程中起作用,终止子在胰岛素基因的翻译过程中起作用,D 错误。 12.(1)解旋酶 加热至 90~95 ℃ 氢键 (2)Taq DNA 聚合酶热稳定性高,而大肠杆菌 DNA 聚合酶在高温下会失活 13.(1)不同的限制酶识别并切割不同的碱基序列 T4 DNA 连接酶 (2)编码蛋白质的基因 启动子 RNA 聚合酶 (3)Ca2+(CaCl2 溶液) 用于 鉴定和筛选导入了基因表达载体的农杆菌 (4)PCR 14.(1)限制性内切核酸 (或限制) 核苷酸序列 (2)磷酸二酯键 DNA 单链 以 DNA 为模板的 DNA 链的延伸 (3)②④ (4)B 【解析】(1)根据题图可知,步骤Ⅰ是获取目的 DNA 片段,所用的酶 EcoR Ⅰ是一种限制 酶,其能识别特定的核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断 开。(2)步骤Ⅱ是将目的 DNA 片段连接成环状,其中 DNA 连接酶的作用是催化相邻核苷酸之 间的 3'-羟基和 5'-磷酸间形成磷酸二酯键。PCR 循环中,升高温度到 95 ℃是为了打开氢键使 双链解旋,获得 DNA 单链,Taq DNA 聚合酶的作用是催化游离的脱氧核苷酸连接到引物 3'端, 合成 DNA 子链。(3)引物的作用是使 DNA 聚合酶能够从引物的 3'端开始延伸 DNA 子链,因 为DNA的合成方向总是从子链的5'端向3'端延伸,故为扩增未知序列,选择的与模板链相结合 的引物应为 5'-TCATGAGCGCATAGTT-3'(引物④)和 5'-GCAATGCGTAGCCTCT-3'(引物②)。 (4)分析题意可知,片段 F 的两端为限制酶 EcoR Ⅰ切割后产生的黏性末端,因此其 5'端序列应 为 AATT-,3'端序列应为-TTAA,B 正确。 学案设计(二) 学习目标 1.阐明基因工程的原理和基本操作程序。 2.针对人类生产或生活中的某一需求,选取适当的基因工程的技术和方法,尝试设计获得 某一转基因产品的方案。 3.尝试进行 PCR 的基本操作并用琼脂糖凝胶电泳鉴定 PCR 的产物。 自主预习 第一步 目的基因的筛选与获取 一、阅读教材 76 页相关内容,回答下列问题: 1.什么是目的基因,举例说明?