为它是抑制肽聚糖的合成,因此对生长旺盛的微生物具有明显的抑制作用,而对生长 休止状态的细胞,则无作用;溶菌酶广泛存在于卵清、人的泪液和鼻涕、部分细菌和 噬菌体中,它能有效地水解细菌的肽聚糖,其作用部位就是N-乙酰胞壁酸的1位碳和 N乙酰葡萄糖胺的4位碳之间的Apha-14糖苷键。它对生长期和休止期的细胞均有 作用 8.a.液体稀释法对未知菌样作连续的10倍系列稀释。根据估计数,从最适宜的3个 连续的10倍稀释液中各取5m试样,接种到3组共15支装有培养液的试管中(每管 接入1m)。经培养后,记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查 MPN(most probable number)表,再根据样品的稀释倍数就可计算出其中活菌含量。 b.平皿菌落计数法将发酵液稀释后涂布在固体培养基表面,也可将熔化后冷却至 45-50℃的固体培养基与一定稀释度的菌悬液混合,凝固后培养适当时间,测定菌落 形成单位的数目。不同菌种的菌落大小不同,一般控制在9厘米培养皿中生长50-500 个菌落为佳。该法可以反映样品中活菌的数量。较适合于细菌和酵母菌,不适于霉菌。 有人将培养基放在固定于载玻片上的小环中,将细胞接种到这微型平板上,经短时间 培养后,将其移到显微镜下观测菌落数目。与以上平皿计数法相比,它能更快速获得 c.细胞组分ATP定量法ATP在一定的微生物细胞中含量很稳定,一般是10°M数量 级。典型细菌细胞的ATP含量为每克细胞干重含有1毫克ATP。因为细胞死亡几分 钟内,ATP就会被水解,所以,以ATP为指标,可以快速、灵敏地反映活菌体数量。 ATP测定可以利用萤光素酶催化的生物发光反应。 9恒化培养与恒浊培养的比较 装置 控制对象‖生长限‖培养液流速‖生长速度 产物 应用范围 制因子 恒化器‖培养液流速‖有 恒定 低于最高生‖不同生长速‖实验室为主 长速度 度的菌体 恒浊器‖菌液密度‖无 不恒定最高生长速大量菌体或‖生产为主 度 与菌体生长 平行的代谢 产物为它是抑制肽聚糖的合成，因此对生长旺盛的微生物具有明显的抑制作用，而对生长 休止状态的细胞，则无作用；溶菌酶广泛存在于卵清、人的泪液和鼻涕、部分细菌和 噬菌体中，它能有效地水解细菌的肽聚糖，其作用部位就是 N-乙酰胞壁酸的 1 位碳和 N-乙酰葡萄糖胺的 4 位碳之间的 Alpha-1,4 糖苷键。它对生长期和休止期的细胞均有 作用。 8. a. 液体稀释法 对未知菌样作连续的 10 倍系列稀释。根据估计数，从最适宜的 3 个 连续的 10 倍稀释液中各取 5ml 试样，接种到 3 组共 15 支装有培养液的试管中（每管 接入 1ml）。经培养后，记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查 MPN(most probable number )表，再根据样品的稀释倍数就可计算出其中活菌含量。 b. 平皿菌落计数法 将发酵液稀释后涂布在固体培养基表面，也可将熔化后冷却至 45-50℃的固体培养基与一定稀释度的菌悬液混合，凝固后培养适当时间，测定菌落 形成单位的数目。不同菌种的菌落大小不同，一般控制在 9 厘米培养皿中生长 50-500 个菌落为佳。该法可以反映样品中活菌的数量。较适合于细菌和酵母菌，不适于霉菌。 有人将培养基放在固定于载玻片上的小环中，将细胞接种到这微型平板上，经短时间 培养后，将其移到显微镜下观测菌落数目。与以上平皿计数法相比，它能更快速获得 结果。 c.细胞组分 ATP 定量法 ATP 在一定的微生物细胞中含量很稳定，一般是 10-6M 数量 级。典型细菌细胞的 ATP 含量为每克细胞干重含有 1 毫克 ATP。因为细胞死亡几分 钟内，ATP 就会被水解，所以，以 ATP 为指标，可以快速、灵敏地反映活菌体数量。 ATP 测定可以利用萤光素酶催化的生物发光反应。 9 恒化培养与恒浊培养的比较 装置 控制对象 生长限 制因子 培养液流速 生长速度 产物 应用范围 恒化器 培养液流速 有 恒定 低于最高生 长速度 不同生长速 度的菌体 实验室为主 恒浊器 菌液密度 无 不恒定 最高生长速 度 大量菌体或 与菌体生长 平行的代谢 产物 生产为主