实验十一紫外诱变技术及抗药性突变菌株的筛选 I.紫外诱变技术 一实验目的 以紫外线处理细菌细胞为例，学习微生物诱变育种的基本技术。了解紫外线对细南细胞 的作用。 二实验材料和用具 菌株：大肠杆菌(Escherichiacol) 培养基：营养肉汤(nutrintbroth)固体和液体培养基 生理盐水等 器皿：10ml及1ml的移液管，无菌试管，无菌培养皿，无菌三角瓶（内有无菌的玻璃 珠2040粒)，无菌漏斗（内有两层擦镜纸），无菌离心管，离心机，紫外诱变箱等 三实验原理 以微生物的自然变易作为基础的筛选菌种的机率并不很高。因为自发突变率小，一个基 因的自发突变率仅为10100左右。为了加大突变频率，可采用物理或化学的因素进行诱 发突变。物理因素中目前使用得最方便且十分有效是UV,UV诱变一般采用15w的紫外灭 菌灯，其光谱比较集中在253.7mm处，这与DNA的吸收波长一致，可引起DNA分子结枸 发生变化，特别是嘧啶间形成胸腺嘧啶二聚体，从而引起菌种的遗传特性发生变易。在生产 和科研中可利用此法获得突变株。 四实验内容 1、对出发菌株进行处理，制备单细胞悬液 2、紫外线进行处理： 3、用平板菌落计数法测定致死率： 实验十一 紫外诱变技术及抗药性突变菌株的筛选 Ⅰ. 紫外诱变技术 一 实验目的 以紫外线处理细菌细胞为例，学习微生物诱变育种的基本技术。了解紫外线对细菌细胞 的作用。 二 实验材料和用具 菌株：大肠杆菌（Escherichia coli） 培养基：营养肉汤（nutrient broth）固体和液体培养基 生理盐水等 器皿：10ml 及 1ml 的移液管，无菌试管，无菌培养皿，无菌三角瓶（内有无菌的玻璃 珠 20~40 粒），无菌漏斗（内有两层擦镜纸），无菌离心管，离心机，紫外诱变箱等。 三 实验原理 以微生物的自然变易作为基础的筛选菌种的机率并不很高。因为自发突变率小，一个基 因的自发突变率仅为 10-6~10-10 左右。为了加大突变频率，可采用物理或化学的因素进行诱 发突变。物理因素中目前使用得最方便且十分有效是 UV，UV 诱变一般采用 15w 的紫外灭 菌灯，其光谱比较集中在 253.7nm 处，这与 DNA 的吸收波长一致，可引起 DNA 分子结构 发生变化，特别是嘧啶间形成胸腺嘧啶二聚体，从而引起菌种的遗传特性发生变易。在生产 和科研中可利用此法获得突变株。 四 实验内容 1、对出发菌株进行处理，制备单细胞悬液； 2、紫外线进行处理； 3、用平板菌落计数法测定致死率；