实验三发酵过程动力学实验 实验老师准备 1、种子培养基(实验老师准备4个100m种子) 2、产酶培养基确定(实验老师准备15瓶100ml产酶培养基和200ml已经长好 的种子),培养基的组成按上次实验配方设计。 实验目的 学习生物反应过程的参数测定和计算方法 仪器 摇床(最大转速250rmin),紫外分光光度计、电热恒温水浴槽、烘箱 电子天平(感量0001g) 三.试剂 1、DNS试剂:取6.3g3,5-二硝基水杨酸(DNS)和262mL2 mol/NAoH溶液 加到酒石酸钾钠的热溶液中(19g酒石酸钾钠溶于500mL水中),再加5g重蒸酚 和5g亚硫酸钠,搅拌使其溶解,冷却后加水定容至1000mn,保存于棕色瓶中放 置7天后使用 2、测定蛋白酶活试剂同上次实验。 .实验方法 1、生物量的测定 生物量的测定方法有比浊法和直接称重法等。本实验采用直接称重法。将发 酵液取出,在两层纱布上过滤菌体,自来水冲洗2-3次,收集菌体,在布氏漏斗 上抽干后称温重。 2、还原糖的测定 2.1原理 在碱性条件下,还原糖与3、5—二硝基水杨酸共热,3、5一二硝基水杨酸被 还原为3一氨基一5一硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其它 物质。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度呈一定的比例关 系,可在722型分光光度计540nm波长测定棕红色物质的吸光度值。查标准曲线计 算,可求出发酵液中还原糖的含量。 2.2实验步骤 (1)发酵液单层滤纸过滤,滤液0.2m1l稀释至含糖量2-8mg/100ml为试样。实验三 发酵过程动力学实验 实验老师准备： 1、种子培养基（实验老师准备 4 个 100ml 种子） 2、产酶培养基确定（实验老师准备 15 瓶 100ml 产酶培养基和 200ml 已经长好 的种子），培养基的组成按上次实验配方设计。 一．实验目的 学习生物反应过程的参数测定和计算方法 二．仪器 摇床（最大转速250r/min），紫外分光光度计、电热恒温水浴槽、烘箱 电子天平（感量0.001g） 三．试剂 1、DNS试剂：取6.3g3,5-二硝基水杨酸（DNS）和262mL2mol/LNaOH溶液 加到酒石酸钾钠的热溶液中（192g酒石酸钾钠溶于500 mL水中），再加5g重蒸酚 和5g亚硫酸钠，搅拌使其溶解，冷却后加水定容至1000mL，保存于棕色瓶中放 置7天后使用。 2、测定蛋白酶活试剂同上次实验。 三．实验方法 1、生物量的测定 生物量的测定方法有比浊法和直接称重法等。本实验采用直接称重法。将发 酵液取出，在两层纱布上过滤菌体，自来水冲洗2-3次，收集菌体，在布氏漏斗 上抽干后称温重。 2、还原糖的测定 2.1原理 在碱性条件下，还原糖与3、5－二硝基水杨酸共热，3、5－二硝基水杨酸被 还原为3－氨基－5－硝基水杨酸（棕红色物质），还原糖则被氧化成糖酸及其它 物质。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度呈一定的比例关 系，可在722型分光光度计540nm波长测定棕红色物质的吸光度值。查标准曲线计 算，可求出发酵液中还原糖的含量。 2.2实验步骤 （1） 发酵液单层滤纸过滤，滤液0.2ml稀释至含糖量2-8mg/100ml为试样