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荧光原位杂交技术(FSH) 仇均易16307130065 、技术简介 荧光原位杂交技术(FISH)是在染色体、间期细胞核和DNA纤维上进行DNA序列定 位的一种有效手段。该技术是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展 起来的一种非放射性原位杂交技术。在20世纪90年代,FISH在方法上逐步形成了从单色向多 色、从中期染色体FISH向粗线期染色体FISH再向iber-FISH的发展趋势,灵敏度和分辨率也 有了大幅度的提高。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构的研究、染色体精细结 构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学等多个领域中 、技术原理 Fluoresence In Situ Hybridization probe DNA Denature Hybridize Labeling with fluorescent dye 荧光原位杂交技术是用已知的标记单链核酸为探针,根据核酸碱基互补配对原理,与待 检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。进而通过带有荧光 基团的抗体去识别半抗原进行检测,或者用荧光基团对探针进行直接标记并与目标序列结 合’最后利用荧光显微镜直接观察目标序列在细胞核丶染色体或切片组织中的分布情况。由 于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列,因此可以使用探针直接与染色体进 行杂交从而在染色体上定位特定的基因。荧光原位杂交技术(FISH) 仇均易 16307130065 ⼀、技术简介 荧光原位杂交技术( FISH) 是在染⾊体、间期细胞核和 DNA 纤维上进⾏ DNA 序列定 位的⼀种有效⼿段。该技术是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展 起来的⼀种⾮放射性原位杂交技术。在20世纪90年代,FISH在⽅法上逐步形成了从单⾊向多 ⾊、从中期染⾊体FISH向粗线期染⾊体FISH再向fiber-FISH的发展趋势,灵敏度和分辨率也 有了⼤幅度的提⾼。⽬前这项技术已经⼴泛应⽤于动植物基因组结构的研究、染⾊体精细结 构变异分析、病毒感染分析、⼈类产前诊断、肿瘤遗传学等多个领域中。 ⼆、技术原理 荧光原位杂交技术是⽤已知的标记单链核酸为探针,根据核酸碱基互补配对原理,与待 检材料中未知的单链核酸进⾏异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。进⽽通过带有荧光 基团的抗体去识别半抗原进⾏检测,或者⽤荧光基团对探针进⾏直接标记并与⽬标序列结 合,最后利⽤荧光显微镜直接观察⽬标序列在细胞核、染⾊体或切⽚组织中的分布情况。由 于DNA分⼦在染⾊体上是沿着染⾊体纵轴呈线性排列,因此可以使⽤探针直接与染⾊体进 ⾏杂交从⽽在染⾊体上定位特定的基因
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