酶分子中含有多种可解离的基团,如一COOH、一NH2、一SH、一OH、咪唑基、胍基等。 在最适pH时,各基团的解离状态处于使构象正常及活性中心处于结合底物和催化反应的最佳状 态。当pH偏离最适pH时,活性中心基团的解离状态发生变化,使酶与底物的结合能力(亲和 力)下降,催化能力也下降,致使酶活性下降,即保持正确解离状态的酶分子比例下降。若pH 偏离得太多,导致构象发生不可逆变化,就会使酶变性失活。如溶菌酶活性中心的两个氨基酸只 有处于Asp52-CO和Gu35-COOH状态下才具有活性 底物的解离状态也受pH的影响,从而影响到底物与酶的结合及被催化反应 6.1.3酶的酸碱稳定性 般来说,酶反应的最适pH也是使酶最稳定的pH,偏离的plH会使酶分子的构象发生变化 构象变化的程度与pH偏离的程度及偏离pH处理的时间有关。若pH偏离不多,或处理时间较 短,回复到最稳定pH后,酶活性可得到恢复,这种恢复也是随着时间的推移逐渐发生的。若p 偏离较多或处理的时间较长,则酶发生不可逆失活, 614pH影响酶反应速度的动力学 下面讨论几种不同的解离体系的动力学,并假定在实验涉及到的pH范围内,酶的构象不发 生变化 6141游离酶和ES复合物二者的解离体系 A.解离模式 假定各可逆过程均迅速达到平衡,ESH→EH+P为限速反应。 B.速度方程的推导 用迅速平衡法处理: JIH EH] EH2TS K EHT EH+P LEHSTHTI LEH,S2 酶分子中含有多种可解离的基团，如－COOH、－NH2、－SH、－OH、咪唑基、胍基等。 在最适 pH 时，各基团的解离状态处于使构象正常及活性中心处于结合底物和催化反应的最佳状 态。当 pH 偏离最适 pH 时，活性中心基团的解离状态发生变化，使酶与底物的结合能力（亲和 力）下降，催化能力也下降，致使酶活性下降，即保持正确解离状态的酶分子比例下降。若 pH 偏离得太多，导致构象发生不可逆变化，就会使酶变性失活。如溶菌酶活性中心的两个氨基酸只 有处于 Asp52－COO－和 Glu35－COOH 状态下才具有活性。 底物的解离状态也受 pH 的影响，从而影响到底物与酶的结合及被催化反应。 6.1.3 酶的酸碱稳定性 一般来说，酶反应的最适 pH 也是使酶最稳定的 pH，偏离的 pH 会使酶分子的构象发生变化， 构象变化的程度与 pH 偏离的程度及偏离 pH 处理的时间有关。若 pH 偏离不多，或处理时间较 短，回复到最稳定 pH 后，酶活性可得到恢复，这种恢复也是随着时间的推移逐渐发生的。若 pH 偏离较多或处理的时间较长，则酶发生不可逆失活。 6.1.4 pH 影响酶反应速度的动力学 下面讨论几种不同的解离体系的动力学，并假定在实验涉及到的 pH 范围内，酶的构象不发 生变化。 6.1.4.1 游离酶和 ES 复合物二者的解离体系 A．解离模式 假定各可逆过程均迅速达到平衡，ESH→EH＋P 为限速反应。 B．速度方程的推导 用迅速平衡法处理： 1 2 [ ] [ ][ ] Ke EH EH H = + + ………① 2 [ ] [ ][ ] Ke EH E H = − + ………② 1 2 [ ] [ ][ ] Kes EH S EHS H = + + ………③