核酸等,对动物细胞的生长繁殖具有促进作用。同时,血清对细胞贴壁和保护亦有明显作用, 且能中和有毒物质的毒性,使细胞不受伤害。 图14-1动物细胞形态 (a)成纤维细胞型:(b)上皮细胞型:(c)游走细胞型:(d)多形性细胞型 合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成的,具有一定的组成。但这 种模拟不是被动和不加选择的,而是在体外反复实验和筛选、进行强化和重新组合后形成的 人工合成培养基。这种培养基在很多方面有天然培养基无法相比的优点。它给细胞提供了 个近似体内生存环境,又便于控制和标准化的体外生存环境。目前所有细胞培养室都己采用 经标准化生产、组份和含量都相对固定的各种合成培养基,如 Eagle基本培养基和更复杂的 NCTC109,TC199,HEM,DE,RPMI1640, McCoy5A,HAMF12等。尽管现代的合成培养基成份 和含量已经较为复杂,但仍然不能完全满足体外培养细胞生长的需要。在合成培养基中都或 多或少的要加入一定比例的灭然培养基加以补充。目前多采用胎牛血清、小牛血清、马血清 等,比例从百分之几到百分之几十不等,要根据需要而定。其他各种天然培养基也可根据需 要加入 合成培养基的种类虽多,但一般都含有氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和一些 其它辅助性成分。 (1)氨基酸必需氨基酸是动物细胞本身不能合成的,因此,在制备培养基时需加入必 需氨基酸,另外还需要半胱氨酸和酪氨酸。而且由于细胞系不同,对各种氨基酸的需要也不 同。有时也加入其他非必需氨基酸,氨基酸浓度常常限制可得到的最大细胞密度,其平衡可 影响细胞存活的生长速率。在细胞培养中,大多数细胞需要谷氨酰胺作为能源和碳源 (2)维生素 Eagle基本培养基中只含B族维生素,其他维生素都靠从血清中取得。血 清浓度降低时,对其他维生素的需求更加明显,但也有些情况,即使血清存在,它们也必不 可少。维生素限制可从细胞存活和生长速率看出,而不是以最大细胞密度为指标 (3)碳水化合物碳水化合物是细胞生命的能量来源,有的是合成蛋白质和核酸的成分 主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸钠等 (4)无机盐无机盐是细胞的重要组成部分之一,它们积极参与细胞的代谢活动。无机 盐中Na'、K'、Mg2、Ca2、CI、S02、P0和HCO0等金属离子及酸根离子是决定培养基渗透 压的主要成分。对悬浮培养,要减少钙,可使细胞聚集和贴壁最少,碳酸氢钠浓度与气相 CO2浓度有关。 5)有机添加剂复杂培养基都含有核苷、柠檬酸循环中间体、丙酮酸、脂类、氧化还 原剂如抗坏血酸、谷胱甘肽等及其他各种化合物。同样,当血清量减少时,必须添加这种化 合物,它们对克隆和维持这些特殊细胞有益。 (6)血清组织细胞培养中常用的天然培养基是血清。这是因为血清中含有大量的蛋白核酸等，对动物细胞的生长繁殖具有促进作用。同时，血清对细胞贴壁和保护亦有明显作用， 且能中和有毒物质的毒性，使细胞不受伤害。 图 14-1 动物细胞形态 （a）成纤维细胞型；（b）上皮细胞型；（c）游走细胞型；（d）多形性细胞型 合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成的，具有一定的组成。但这 种模拟不是被动和不加选择的，而是在体外反复实验和筛选、进行强化和重新组合后形成的 人工合成培养基。这种培养基在很多方面有天然培养基无法相比的优点。它给细胞提供了一 个近似体内生存环境，又便于控制和标准化的体外生存环境。目前所有细胞培养室都己采用 经标准化生产、组份和含量都相对固定的各种合成培养基，如 Eagle 基本培养基和更复杂的 NCTC109，TC199，HEM，DME，RPMI1640，McCoy5A，HAMF12 等。尽管现代的合成培养基成份 和含量已经较为复杂，但仍然不能完全满足体外培养细胞生长的需要。在合成培养基中都或 多或少的要加入—定比例的灭然培养基加以补充。目前多采用胎牛血清、小牛血清、马血清 等，比例从百分之几到百分之几十不等，要根据需要而定。其他各种天然培养基也可根据需 要加入。 合成培养基的种类虽多，但一般都含有氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和一些 其它辅助性成分。 (1)氨基酸 必需氨基酸是动物细胞本身不能合成的，因此，在制备培养基时需加入必 需氨基酸，另外还需要半胱氨酸和酪氨酸。而且由于细胞系不同，对各种氨基酸的需要也不 同。有时也加入其他非必需氨基酸，氨基酸浓度常常限制可得到的最大细胞密度，其平衡可 影响细胞存活的生长速率。在细胞培养中，大多数细胞需要谷氨酰胺作为能源和碳源。 (2)维生素 Eagle 基本培养基中只含 B 族维生素，其他维生素都靠从血清中取得。血 清浓度降低时，对其他维生素的需求更加明显，但也有些情况，即使血清存在，它们也必不 可少。维生素限制可从细胞存活和生长速率看出，而不是以最大细胞密度为指标。 (3)碳水化合物 碳水化合物是细胞生命的能量来源，有的是合成蛋白质和核酸的成分， 主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸钠等。 (4)无机盐 无机盐是细胞的重要组成部分之一，它们积极参与细胞的代谢活动。无机 盐中 Na+、K +、Mg2+、Ca 2+、Cl -、SO4 2-、PO4 3-和 HCO3 -等金属离子及酸根离子是决定培养基渗透 压的主要成分。对悬浮培养，要减少钙，可使细胞聚集和贴壁最少，碳酸氢钠浓度与气相 CO2 浓度有关。 (5)有机添加剂 复杂培养基都含有核苷、柠檬酸循环中间体、丙酮酸、脂类、氧化还 原剂如抗坏血酸、谷胱甘肽等及其他各种化合物。同样，当血清量减少时，必须添加这种化 合物，它们对克隆和维持这些特殊细胞有益。 (6)血清 组织细胞培养中常用的天然培养基是血清。这是因为血清中含有大量的蛋白