正在加载图片...
10-15分钟) 15.加入100uDNA水化溶剂,65度1小时,其间不断敲击管子以助 均匀或者室温或4度过夜即可。 16.2-8度保存。 注:采血需用EDTA或肝素抗凝。 (二)方法二 以处理100ul全血为例。 1.按处理样品数准备1.5ml离心管,并各加入GenTLESolutionI500l。 2.把混合均匀的l00ul血液,加入到分装好GenTLE Solution I的离心管 中,立即振荡数秒钟*1。 1不管处理多少样品,血液加入到GenTLE Solutionl中,要立即 进行振荡混合,否则有可能降低收量。 3.室温放置10分钟以上,然后在室温2条件下12,000rpm以上离心5 分钟。离心时,请注意离心管在离心机里的摆放方向要统一,离心管的小耳 朵朝上(图4-I)。此时几乎看不到DNA沉淀。 2若离心温度低,会对收量和纯度有影响,请于20℃以上离心。 4.用移液枪小心除去管中溶液,此时沉淀看不清,紧贴在离心管外侧(带 小耳朵一侧)的内壁上,除去溶液时,请一定注意枪头不要碰到离心管外侧 的内壁,应插到离心管内侧的底部(图4-2),注意不要吸走沉淀物。 5.加入lml的GenTLE SolutionⅡ,此时GenTLE SolutionⅡ应沿着离心 管内侧的内壁加入到离心管中(图43)。 图4-1 图4-2 图4-3 6.轻柔地上下颠倒离心管数次*3,室温12,000rpm以上离心2分钟,用 移液枪小心地除去上清溶液(方法参见实验操作4.)。 3剧烈振荡将影响收量和纯度。 7.向离心管中加入GenTLE Solution III500ul,轻微振荡10秒钟充分混 合。 8.室温12,000pm以上离心5分钟,把上清溶液移至另一个新的离心管 中。 9.加入等体积(500u)的异丙醇,上下轻柔颠倒数次,均匀混合 5 图 4-1 图 4-2 图 4-3 10-15 分钟) 15.加入 100μlDNA 水化溶剂,65 度 1 小时,其间不断敲击管子以助 均匀或者室温或 4 度过夜即可。 16.2-8 度保存。 注:采血需用 EDTA 或肝素抗凝。 (二)方法二 以处理 100μl 全血为例。 1.按处理样品数准备 1.5ml 离心管,并各加入 GenTLESolutionI 500μl。 2.把混合均匀的 100μl 血液,加入到分装好 GenTLE Solution I 的离心管 中,立即振荡数秒钟*1。 *1 不管处理多少样品,血液加入到 GenTLE SolutionI 中,要立即 进行振荡混合, 否则有可能降低收量。 3.室温放置 10 分钟以上,然后在室温*2 条件下 12,000 rpm 以上离心 5 分钟。离心时,请注意离心管在离心机里的摆放方向要统一,离心管的小耳 朵朝上(图 4-1)。此时几乎看不到 DNA 沉淀。 *2 若离心温度低,会对收量和纯度有影响,请于 20℃以上离心。 4.用移液枪小心除去管中溶液,此时沉淀看不清,紧贴在离心管外侧(带 小耳朵一侧)的内壁上,除去溶液时,请一定注意枪头不要碰到离心管外侧 的内壁,应插到离心管内侧的底部(图 4-2),注意不要吸走沉淀物。 5.加入 1 ml 的 GenTLE Solution II。此时 GenTLE Solution II 应沿着离心 管内侧的内壁加入到离心管中(图 4-3)。 6.轻柔地上下颠倒离心管数次*3,室温 12,000 rpm 以上离心 2 分钟,用 移液枪小心地除去上清溶液(方法参见实验操作 4.)。 *3 剧烈振荡将影响收量和纯度。 7.向离心管中加入 GenTLE Solution III 500μl,轻微振荡 10 秒钟充分混 合。 8.室温 12,000rpm 以上离心 5 分钟,把上清溶液移至另一个新的离心管 中。 9.加入等体积(500μl)的异丙醇,上下轻柔颠倒数次,均匀混合
<<向上翻页向下翻页>>
©2008-现在 cucdc.com 高等教育资讯网 版权所有