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环境,酶的活性减弱 3.试剂和器材 (1)试剂 ①稀释200倍数的新鲜唾液②新配置的溶于0.3%氯化钠的0.5%淀粉溶液③碘化钾 碘溶液④0.zπol/磷酸氢二钠溶液⑤o.lmol/柠檬酸溶液⑥pH试纸:p5、pH5.8、pH6.8、 pH8.0 (2)仪器试管及试管夹、恒温水浴锅、移液管(10mL、2皿L各1支、5m2支)、白瓷板、 滴管、锥形瓶等 4.操作步骤 (1)取4支标有号码的5omL锥形瓶,用按表8-1添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.lmol/L 柠檬酸溶液以制备pH5.0~8.0的4种缓冲液。 表8-1pH5.0~8.0的缓冲液制备表 隹形瓶号 0.2mol/L磷酸氢二钠/mL 0.1mol/L柠檬酸/mL 5.15 4.85 5.0 6.05 3.95 234 5.8 7.72 9.72 B8试 6. (2)从4个锥形瓶中各取缓冲液3皿L,分别注入4支编好的试管中,随后于每个试管中添 加0.5%淀粉溶液2mL和稀释200倍的唾液2m。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为 lmin。将各试管内容物混匀,并依次置于37℃恒温水浴中保温。 (3)在第4管中加入唾液2min后,每隔lmin由第4管取出1滴混合液,置于白瓷板上, 加1小滴碘化钾-碘溶液,检测淀粉的水解程度。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔,从第 管起,亦均为1min。观察各试管内容物呈现的颜色,分析pH对唾液淀粉酶活性的影响 5.思考题 (1)p对酶活性有何影响?什么是酶反应的最适pH? (2)酶反应的p是否是一个常数?它与哪些因素有关?这种性质对于选择测定酶的活性条 件有什么意义? 实验九酶的激活剂和抑制剂 1.目的要求 (1)了解酶促反应的激活与抑制。 (2)学习检定激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。 2.实验原理 酶的活性常受某些物质的影响,有些物质能使酶的活性增加,称为酶的激活剂,有些物 质会使酶的活性降低,称为酶的抑制剂。很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性。而且 常具有特异性。值得注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的,有些物质在低浓度时为某种酶的 激活剂,而在高浓度时则为该酶的抑制剂 本实验主要观察抑制剂和激活剂对唾液淀粉酶的活性影响。其中氯化钠可以作为唾液淀 粉酶的激活剂,硫酸铜为其抑制剂。值得注意的是,氯化钠达到1/3饱和度时就会抑制唾液 淀粉酶的活性。 3.试剂和器材环境,酶的活性减弱。 3.试剂和器材 (1)试剂 ①稀释 200 倍数的新鲜唾液②新配置的溶于 0.3%氯化钠的 0.5%淀粉溶液③碘化钾- 碘溶液④0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液⑤0.1mol/L 柠檬酸溶液⑥pH 试纸:pH5、pH5.8、pH6.8、 pH8.0。 (2)仪器 试管及试管夹、恒温水浴锅、移液管(10mL、2mL 各 1 支、5mL2 支)、白瓷板、 滴管、锥形瓶等 4.操作步骤 (1)取 4 支标有号码的 50mL 锥形瓶,用按表 8-1 添加 0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液和 0.1mol/L 柠檬酸溶液以制备 pH5.0~8.0 的 4 种缓冲液。 表 8-1 pH5.0~8.0 的缓冲液制备表 锥形瓶号 0.2mol/L 磷酸氢二钠/mL 0.1mol/L 柠檬酸/mL pH 1 5.15 4.85 5.0 2 6.05 3.95 5.8 3 7.72 2.28 6.8 4 9.72 0.28 8.0 (2)从 4 个锥形瓶中各取缓冲液 3mL,分别注入 4 支编好的试管中,随后于每个试管中添 加 0.5%淀粉溶液 2mL 和稀释 200 倍的唾液 2mL。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为 1min。将各试管内容物混匀,并依次置于 37℃恒温水浴中保温。 (3)在第 4 管中加入唾液 2min 后,每隔 1min 由第 4 管取出 1 滴混合液,置于白瓷板上, 加 1 小滴碘化钾-碘溶液,检测淀粉的水解程度。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔,从第 1 管起,亦均为 1min。观察各试管内容物呈现的颜色,分析 pH 对唾液淀粉酶活性的影响。 5.思考题 (1)pH 对酶活性有何影响?什么是酶反应的最适 pH? (2)酶反应的 pH 是否是一个常数?它与哪些因素有关?这种性质对于选择测定酶的活性条 件有什么意义? 实验九 酶的激活剂和抑制剂 1.目的要求 (1)了解酶促反应的激活与抑制。 (2)学习检定激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。 2.实验原理 酶的活性常受某些物质的影响,有些物质能使酶的活性增加,称为酶的激活剂,有些物 质会使酶的活性降低,称为酶的抑制剂。很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性。而且 常具有特异性。值得注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的,有些物质在低浓度时为某种酶的 激活剂,而在高浓度时则为该酶的抑制剂。 本实验主要观察抑制剂和激活剂对唾液淀粉酶的活性影响。其中氯化钠可以作为唾液淀 粉酶的激活剂,硫酸铜为其抑制剂。值得注意的是,氯化钠达到 1/3 饱和度时就会抑制唾液 淀粉酶的活性。 3.试剂和器材
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