图II-4DNA聚合酶催化的DNM链延伸反应 当有底物和模板存在时，DNA聚合酶I可将脱氧核糖核苷酸逐个地加到具有3'OH 末端的多核苷酸RNA引物或DNA)链上形成3 ,5 一磷酸二脂键（图114）。至今已发现 的DNA聚合酶都不能从无到有开始合成DNA链，只能在己有引物的3'端游离一OH上合成 延伸DNA,合成延伸方向为5' →3'。该酶具有3一5'核酸外切酶的活性，能在3' OH端将DNA链水解。在正常聚合条件下，3'→5'外切酶活性很低。一旦出现碱基错配， 则聚合反应停止，由3'→5'外切酵将错配的核苷酸切除，然后继续进行正常的聚合反应。 3'→5'核酸外切酶被认为具有校对的功能。5'→3'核酸外切酶的功能是由5'端水解双 链DNA,切下单核苷酸或一段寡核苷酸。它可能起者切除DNA损伤部分或将5'端 表11-1 大肠杆菌三种DNA聚合酶的性质比较 DNA聚合醇I DNA案合酶I DNA聚合酶I(复合物) 分子结构 单链分子 单链分子 核心酶3个亚基，全酵2个亚基 分子量 109000 120000 400000 每个细胞所含分子数 1020 5”一3聚合作用 3”→5核酸外切酶 5”→3”核酸外切配 模板和引物 完整的双链DNA 其有引物的长单链D 全酶 具有缺口(《100个核作酸)的双链 + + 核心离+ 聚合速度(37℃核酸/in.分子) 1000 100-300 15000以上 pol C.holE,dnaN,dna X.dna 结构基因 pol A Z.dna Q.holA273 图 11-4 DNA 聚 合 酶催化 的 DNA 链延伸 反应 当有底物和模板存在时，DNA 聚合酶 I 可将脱氧核糖核苷酸逐个地加到具有3′—OH 末端的多核苷酸(RNA 引物或 DNA)链上形成 3′，5′—磷酸二脂键(图 11-4)。至今已发现 的DNA聚合酶都不能从无到有开始合成DNA链，只能在已有引物的3′端游离—OH上合成 延伸DNA，合成延伸方向为5′ →3′。该酶具有3′→5′核酸外切酶的活性，能在3′— OH端将DNA链水解。在正常聚合条件下，3′→5′外切酶活性很低。一旦出现碱基错配， 则聚合反应停止，由3′→5′外切酶将错配的核苷酸切除，然后继续进行正常的聚合反应。 3′→5′核酸外切酶被认为具有校对的功能。5′→3′核酸外切酶的功能是由5′端水解双 链DNA，切下单核苷酸或一段寡核苷酸。它可能起着切除DNA损伤部分或将5′端 表 11-1 大 肠 杆 菌三种DNA聚合酶 的性质比较 DNA 聚合酶 I DNA 聚合酶Ⅱ DNA 聚合酶Ⅲ(复合物) 分子结构 分子量 每个细胞所含分子数 5’ →3’聚合作用 3’→5’核酸外切酶 5’→3’核酸外切酶 模板和引物 完整的双链 DNA 具有引物的长单链 DNA 具有缺口(<100 个核苷酸)的双链 DNA 聚合速度(37℃核苷酸／min．分子) 结构基因 单链分子 109 000 400 + + + － + + 1 000 po1 A 单链分子 120 000 100 + + － － － + 100-300 po1 B 核心酶 3 个亚基，全酶 22 个亚基 400 000 10～20 + + － 全酶+ 核心酶+ 15 000 以上 pol C，hol E，dna N，dna X， dna Z，dna Q，ho1 A CH2 H H OH H H H O CH2 H H OH H H H O O P O O O O P O O O P O O 碱基 碱基 O 引物链 模 板 链 CH2 H H O H H H O CH2 H H OH H H H O O O P O 碱基 碱基 O 引物链 模 板 链 PP