4.写出液相色谱的主要部件及作用。 答：输液系统：高压输液泵，输送流动相。分离和进样系统：进样器，色谱柱。 进样、分离。检测系统：把色谱洗脱液中组分的量或浓度转变成电信号。 数据记录处理和计算机控制系统：程序控制仪器，采集数据，处理数据。 5.什么是反相液相色谱？在反相液相色谱法中，极性不同的组分出峰顺序如何？ 对于弱极性组分，随流动相极性增强，保留值如何变化？ 答：流动相极性大于固定相称为反相色谱法。极性大的组分先出峰。随流动相极 性增强，保留值变大。 三、计算（每题15分，共计30分） 1.在2m长的色谱柱上，测得某组分保留时间(tR)6.6min,峰底宽(Y)0.5min, 死时间(tm)l.2min,柱出口用皂膜流量计测得载气体积流速(Fc)40ml/min 固定相(Vs)2.1L,求：（提示：流动相体积，即为死体积） (1)分配容量k(2)死体积Vm(3)调整保留时间(4)分配系数 (5)有效塔板数neff(6)有效塔板高度Heff 答：(1)分配比k=tR'/tm=(6.6-1.2)/1.2=4.5 (2)死体积Vm=tmoFc=1.2×40=48ml (3)调整保留时间VR'=(tR-tm)oFc=(6.6-1.2)×40=216mL (4)分配系数K=koB=(Wm/Ns)=4.5×(48/2.1)=103 (4)有效塔板数neff=16×(tR'/Y)2=16×[(6.6-1.2)]2=1866 (⑤)有效塔板高度Heff=L/neff=2×1000/1866=1.07mm 2.称取含维生素C的试样0.04克，溶于100ml稀疏酸溶液中，再准确量取此溶 液2.00ml稀释至100ml,取此溶液与1cm吸收池中，在245nm处测得吸光 度A值为0.441，求试样中维生素C的百分比浓度。（维生素C在245m处 的E%=560) 答：溶液试样中维生素C的百分质量分数=0,41， 560 试样中维生素C的百分质量分数= 0441×100x10=98.4% 560x10020.04 4. 写出液相色谱的主要部件及作用。 答：输液系统：高压输液泵，输送流动相。分离和进样系统：进样器，色谱柱。 进样、分离。检测系统：把色谱洗脱液中组分的量或浓度转变成电信号。 数据记录处理和计算机控制系统：程序控制仪器，采集数据，处理数据。 5. 什么是反相液相色谱？在反相液相色谱法中，极性不同的组分出峰顺序如何？ 对于弱极性组分，随流动相极性增强，保留值如何变化？ 答：流动相极性大于固定相称为反相色谱法。极性大的组分先出峰。随流动相极 性增强，保留值变大。 三、计算（每题15分，共计30分） 1. 在2m 长的色谱柱上，测得某组分保留时间（tR）6.6min，峰底宽（Y）0.5min， 死时间（tm）1.2min，柱出口用皂膜流量计测得载气体积流速（Fc）40ml/min, 固定相（Vs）2.1mL，求：(提示：流动相体积，即为死体积) （1） 分配容量k（2） 死体积Vm（3） 调整保留时间（4） 分配系数 （5） 有效塔板数neff（6） 有效塔板高度Heff 答：(1)分配比k = tR'/tm = (6.6-1.2)/1.2=4.5 (2) 死体积Vm = tmoFc = 1.2×40 = 48mL (3) 调整保留时间VR'= (tR-tm) oFc = (6.6-1.2)×40 = 216mL (4) 分配系数K=koβ=(Vm/Vs)=4.5×(48/2.1)=103 (4) 有效塔板数neff = 16×( tR'/Y)2=16×[(6.6-1.2)]2=1866 (5) 有效塔板高度Heff =L/neff=2×1000/1866=1.07mm 2. 称取含维生素 C 的试样 0.04 克，溶于 100ml 稀硫酸溶液中，再准确量取此溶 液 2.00ml 稀释至 100ml，取此溶液与 1cm 吸收池中，在 245nm 处测得吸光 度 A 值为 0.441，求试样中维生素 C 的百分比浓度。（维生素 C 在 245nm 处 的 ） 答：溶液试样中维生素 C 的百分质量分数= 560 0.441 % 试样中维生素 C 的百分质量分数= = 98.4% 560 1% E1cm = 0.04 100 2 100 560 100 0.441   