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(3)如果基因中存在不编码的内含子序列,要进行剪接,将其切除。 10.(1)链的起始:原核生物在核糖体小亚基、一个mRNA分子、决定起始的氨酰基tRNA、 GTP、Mg"以及至少三种可溶性蛋白质起始因子( initiation factors,IFs)IF1、IF2和 IF3的参与下,以AUG合成的起始密码子,编码甲酰化甲硫氨酸。蛋白质合成开始时, 首先是决定蛋白质起始的甲酰化甲硫氨酰一tRNA与起始因子IF2结合形成第一个复合 体。同时,核糖体小亚基与起始因子IF3和mRNA结合形成第二个复合体。此过程中在 起始密码子前面大约7个核苷酸的一段mRNA保守序列( AGGAGG)起着关键作用。它与核 糖体小亚基16 SrrNA3’端的一段碱基序列互补,可能起着识别作用。当该序列发生改 变后,皿RNA就不能翻译或者翻译效率很低。接着二个复合体在起始因子IF1和一分子 GDP的作用下,形成一个完整的30S起始复合体。此时,甲酰化甲硫氨酰一tRNA通过tRNA 的反密码子识别起始密码子AUG,而直接进入核糖体的P位 peptide l,P)并释放出IF3 最后与50S大亚基结合,形成完整的70S核糖体,此过程需要水解一分子GDP以提供能 量,同时释放出IF1和IF2,完成肽链的起始 (2)链的延伸:肽链的延伸在原核生物和真核生物中基本一致。当甲酰化甲硫氨酰 tRNA(或甲硫氨酰一tRNA)结合在P位后,与其相临的一个三联体密码位置就称为A位 ( aminoacy l,A)。根据,反密码子与密码子配对的原则,第二个氨基酰tRNA就进入A 位,此过程需要带有一分子GTP的延伸因子Tu( elongation factor,EF-Tu)的参与 EF- TuGTP则是在延伸因子Ts的作用下水解一分子的GTP而形成的。随后,在转肽酶 ( peptidy l transferase)的催化下,在A位的氨基酰tRNA上的氨基酸残基与在P位上 的氨基酸的碳末端间形成多肽键。过去认为核糖体50S大亚基本身就有转肽酶的活性 但现在发现50S大亚基中的23SRNA才真正具有转肽酶的活性。此过程水解与EF-Tu 结合的GTP而提供能量。最后是核糖体向前移一个三联体密码,原来在A位的多肽一tRNA 转入P位,而原在P位的tRNA离开核糖体。此过程需要延伸因子G(EF-G)和水解GTP 提供能量。这样空出的A位就可以接合另外一个氨基酰tRNA从而开始第二轮的多肽链 延伸 多肽链的延伸速度非常快,在大肠杆菌中,多肽链上每增加一个氨基酸只需0.05秒, 也就是说合成一个300个氨基酸的多肽链只需要15秒钟。(3)如果基因中存在不编码的内含子序列,要进行剪接,将其切除。 10.(1)链的起始:原核生物在核糖体小亚基、一个 mRNA 分子、决定起始的氨酰基 tRNA、 GTP、Mg++以及至少三种可溶性蛋白质起始因子(initiation factors,IFs)IF1、IF2 和 IF3 的参与下,以 AUG 合成的起始密码子,编码甲酰化甲硫氨酸。蛋白质合成开始时, 首先是决定蛋白质起始的甲酰化甲硫氨酰-tRNA 与起始因子 IF2 结合形成第一个复合 体。同时,核糖体小亚基与起始因子 IF3 和 mRNA 结合形成第二个复合体。此过程中在 起始密码子前面大约 7 个核苷酸的一段 mRNA 保守序列(AGGAGG)起着关键作用。它与核 糖体小亚基 16S rRNA 3’端的一段碱基序列互补,可能起着识别作用。当该序列发生改 变后,mRNA 就不能翻译或者翻译效率很低。接着二个复合体在起始因子 IF1 和一分子 GDP 的作用下,形成一个完整的 30S 起始复合体。此时,甲酰化甲硫氨酰-tRNA 通过 tRNA 的反密码子识别起始密码子 AUG,而直接进入核糖体的 P 位(peptidyl,P)并释放出 IF3。 最后与 50S 大亚基结合,形成完整的 70S 核糖体,此过程需要水解一分子 GDP 以提供能 量,同时释放出 IF1 和 IF2,完成肽链的起始; (2)链的延伸:肽链的延伸在原核生物和真核生物中基本一致。当甲酰化甲硫氨酰- tRNA(或甲硫氨酰-tRNA)结合在 P 位后,与其相临的一个三联体密码位置就称为 A 位 (aminoacyl,A)。根据,反密码子与密码子配对的原则,第二个氨基酰 tRNA 就进入 A 位,此过程需要带有一分子 GTP 的延伸因子 Tu(elongation factor,EF-Tu)的参与。 EF-TuGTP 则是在延伸因子 Ts 的作用下水解一分子的 GTP 而形成的。随后,在转肽酶 (peptidyl transferase)的催化下,在 A 位的氨基酰 tRNA 上的氨基酸残基与在 P 位上 的氨基酸的碳末端间形成多肽键。过去认为核糖体 50S 大亚基本身就有转肽酶的活性, 但现在发现 50S 大亚基中的 23S RNA 才真正具有转肽酶的活性。此过程水解与 EF-Tu 结合的 GTP 而提供能量。最后是核糖体向前移一个三联体密码,原来在 A 位的多肽-tRNA 转入 P 位,而原在 P 位的 tRNA 离开核糖体。此过程需要延伸因子 G(EF-G)和水解 GTP 提供能量。这样空出的 A 位就可以接合另外一个氨基酰 tRNA 从而开始第二轮的多肽链 延伸; 多肽链的延伸速度非常快,在大肠杆菌中,多肽链上每增加一个氨基酸只需 0.05 秒, 也就是说合成一个 300 个氨基酸的多肽链只需要 15 秒钟
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