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3.掌握重组λ噬菌体DNA分子转导大肠杆菌。 4.了解重组DNA分子转入真核细胞。 5.掌握核酸分子杂交检测法来筛选重组子 (四)重点、难点及教学建议 重点:感受态细胞的制备,重组质粒DNA分子转化大肠杆菌,重组λ噬菌体DNA分子转导 大肠杆菌,核酸分子杂交检测法 难点:重组λ噬菌体DNA分子转导大肠杆菌,核酸分子杂交检测法。 教学建议: 1.对转化、转导等内容作简要复习,重点在于讲清楚重组DNA分子转入原核生物细胞。 2.对重组子的筛选内容,除重点内容外,其他内容,如:免疫化学检测法,转译筛选法 亚克隆法等仅作了解。 第六章外源基因的表达 (-)教学目的 学习和了解外源基因在原核生物和真核生物中表达的特点、表达的调控序列、表达载体 和外源基因导入真核细胞的方法 (二)教学内容 第一节基因表达的机制 1.外源基因的起始转录 2.mRNA的延伸与稳定性 3.外源基因mRNA的有效翻译 4.表达蛋白在细胞中的稳定性 5.目的基因沉默 第二节基因表达的调控元件 1.启动子 2.增强子 3.终止子 4.衰减子 5.绝缘子 6.反义子 第三节外源基因表达系统7 3.掌握重组 λ 噬菌体 DNA 分子转导大肠杆菌。 4.了解重组 DNA 分子转入真核细胞。 5.掌握核酸分子杂交检测法来筛选重组子 (四)重点、难点及教学建议 重点:感受态细胞的制备,重组质粒 DNA 分子转化大肠杆菌,重组 λ 噬菌体 DNA 分子转导 大肠杆菌,核酸分子杂交检测法。 难点:重组 λ 噬菌体 DNA 分子转导大肠杆菌,核酸分子杂交检测法。 教学建议: 1. 对转化、转导等内容作简要复习,重点在于讲清楚重组 DNA 分子转入原核生物细胞。 2. 对重组子的筛选内容,除重点内容外,其他内容,如:免疫化学检测法,转译筛选法, 亚克隆法等仅作了解。 第六章 外源基因的表达 (一)教学目的 学习和了解外源基因在原核生物和真核生物中表达的特点、表达的调控序列、表达载体 和外源基因导入真核细胞的方法 (二)教学内容 第一节 基因表达的机制 1.外源基因的起始转录 2.mRNA 的延伸与稳定性 3.外源基因 mRNA 的有效翻译 4.表达蛋白在细胞中的稳定性 5.目的基因沉默 第二节 基因表达的调控元件 1.启动子 2.增强子 3.终止子 4.衰减子 5.绝缘子 6.反义子 第三节 外源基因表达系统
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