(二)实验目的 熟练掌握病原线虫的基本形态特征及其所致病害的症状特点。学习分离和鉴定主要植物病原线 虫的方法。 (三)实验内容 1线虫形态的观察 (1)粒线虫属(Anguina) 观察由小麦粒线虫危苦小麦引起的症状，注意小麦受害部位，受害的茎叶有无扭曲或畸形？虫 瘿的外形与麦粒有什么区别？取虫瘘一个，用刀片切开或挑针挑破，挑取虫瘿内部的白色棉絮状物 于载玻片上的水滴中盖上盖玻片，置于低倍镜下镜检，可见到成虫、卵和幼虫。雌虫、雄虫均为线 形，雌虫体形较雄虫粗大，往往卷曲，体内的卵巢顶端弯曲。雄虫昆部有交合刺，交合伞几平包到 尾尖。 (2)茎线虫属(Dirylenchs 观察甘薯茎线虫(D.destructor)危害甘薯的症状，剖开病薯可见到条点状褐色或白粉干腐症状， 挑取少量组织于载玻片的水滴中，加盖玻片镜检，可见到卵、幼虫、成虫等各个虫态。 (3)胞囊线虫属(Heterodera) 观察大豆胞囊线虫(H.glycines)的危害症状。 挑取病根上的雄虫，肉眼可见到线虫头部己钻入寄主组织，虫体外露，多为柠檬形，黄褐色。 制片镜检，大豆胞囊线虫的卵大多不挂出体外，整个雌虫体后期变成颜色深褐的卵囊，特称为胞囊 (少数可排部分卵于体尾的胶质囊内)。 (4)根结线虫属(Meloidogyne) 观察蔬菜根结线虫(M.即.)或花生、茄科植物根结线虫危害症状，镜检观察雌虫虫体形态。 根结线虫属分种的主要依据是：会阴花纹的形态特征，胞囊线虫分种是根据阴门椎周围的形态特征 加以区别的。 2.线虫分离技术：采用改良后的布氏漏斗法 ()在大豆根部取大约500克土样 (2)将土样在铝锅中用自来水溶解，待其澄清。 (3)将上清液在180目网筛上过滤，下层泥沙继续加水溶解，再过筛，如此重复4次。 (4)将网筛上方的物质用水冲洗到小烧杯中 (⑤)漏斗下方连一个10cm左右的橡皮管，将小烧杯中的冲洗液倒入漏斗中 (624h后，打开铁夹，流出少量水，收集于管内。 (⑦)镜检。 （二）实验目的 熟练掌握病原线虫的基本形态特征及其所致病害的症状特点。学习分离和鉴定主要植物病原线 虫的方法。 （三）实验内容 1 线虫形态的观察 （1）粒线虫属（Anguina） 观察由小麦粒线虫危害小麦引起的症状，注意小麦受害部位，受害的茎叶有无扭曲或畸形？虫 瘿的外形与麦粒有什么区别？取虫瘿一个，用刀片切开或挑针挑破，挑取虫瘿内部的白色棉絮状物 于载玻片上的水滴中盖上盖玻片，置于低倍镜下镜检，可见到成虫、卵和幼虫。雌虫、雄虫均为线 形，雌虫体形较雄虫粗大，往往卷曲，体内的卵巢顶端弯曲。雄虫昆部有交合刺，交合伞几乎包到 尾尖。 （2）茎线虫属（Ditylenchus） 观察甘薯茎线虫（D．destructor）危害甘薯的症状，剖开病薯可见到条点状褐色或白粉干腐症状， 挑取少量组织于载玻片的水滴中，加盖玻片镜检，可见到卵、幼虫、成虫等各个虫态。 （3）胞囊线虫属（Heterodera） 观察大豆胞囊线虫（H．glycines）的危害症状。 挑取病根上的雌虫，肉眼可见到线虫头部已钻入寄主组织，虫体外露，多为柠檬形，黄褐色。 制片镜检，大豆胞囊线虫的卵大多不排出体外，整个雌虫体后期变成颜色深褐的卵囊，特称为胞囊 （少数可排部分卵于体尾的胶质囊内）。 （4）根结线虫属（Meloidogyne） 观察蔬菜根结线虫（M．spp．）或花生、茄科植物根结线虫危害症状，镜检观察雌虫虫体形态。 根结线虫属分种的主要依据是：会阴花纹的形态特征，胞囊线虫分种是根据阴门椎周围的形态特征 加以区别的。 2. 线虫分离技术：采用改良后的布氏漏斗法。 (1) 在大豆根部取大约 500 克土样 (2) 将土样在铝锅中用自来水溶解，待其澄清。 (3) 将上清液在 180 目网筛上过滤，下层泥沙继续加水溶解，再过筛，如此重复 4 次。 (4) 将网筛上方的物质用水冲洗到小烧杯中 (5) 漏斗下方连一个 10cm 左右的橡皮管，将小烧杯中的冲洗液倒入漏斗中 (6) 24h 后，打开铁夹，流出少量水，收集于管内。 (7) 镜检