(③)萎蔫：观察番茄青枯病和马铃薯环腐病症状标本。注意观察纵剖番茄茎秆和横切马铃薯薯 块的维管束变色情况。 (4)瘤肿或畸形：观察冠瘿病菌(A.tumefaciens)危害桃树或法国梧桐根冠部引起的冠嫠病。 观察发根病菌(A.rhizogenes).侵染苹果树木根部所引起的发根病标本。观察泡桐丛枝病，腋芽大 量萌发，侧枝丛生：观察枣疯病，芽大量萌发呈丛枝状，花器退化，萼片、花瓣变成叶片状。 2.植物病原细菌形态观察和种类鉴定 2.1植物病原细菌培养形状观察 取培养皿中培养的黄瓜角斑病菌、马铃薯环腐病菌，茄青枯病菌和白菜软腐病菌等，注意观察 菌落颜色、大小、质地，是否产生荧光色素等，和植物病原真菌培养菌落有什么根本性的不同？ 2.2革兰氏染色法 (1)在干净的载玻片上用移菌环移茵少许涂片，每人在同一张玻片的两端分别涂上BS和X0 或CS和RS两个菌株，做好标记。晾干后在火焰上通过两次，固定涂片。 (2)结晶紫染色一分钟。 (3)水洗数秒钟，甩去余下的水，并轻轻吸干（或用碘液冲去余下的水）。 (4)碘液处理一分钟。 (5)水洗数秒钟，用吸水纸吸干，但不能损害菌苔涂片。 (6)用95%酒精褪色。将载玻片斜放在白纸上，从上端滴下酒精，使其顺着整个载玻片均匀 地向下流，直到洗下的酒精无色为止。褪色时间为10一20秒，不能超过30秒，否则阳性菌也可能 被褪色。 (7)水洗数秒钟，吸干。 (8)滴加复染剂复染10秒钟 (9)水洗，吸干，镜检，革兰氏阳性菌呈紫色或蓝黑色：阴性菌呈红色。 (四)实验要求 要求学生掌握植物细菌病害的分类鉴定需要特有的实验技术，熟悉植物细菌病害症状类型和病 原细菌的基本形态，学习植物细菌病害简易诊断方法及病原细菌初步鉴定的程序和技术，为以后植 物细菌病害的正确诊断和病原细菌的分类鉴定打下良好的基础。 (五)主要仪器设备 有关病害标本、照片或新鲜材料。病原菌永久玻片和各种类型的子实体标本。显微镜、擦镜纸、 乳酚油、挑针、载玻片、盖玻片、小纱布。 实验五植物病原线虫的分离和观察 (一)实验类型：验证(3) 萎蔫：观察番茄青枯病和马铃薯环腐病症状标本。注意观察纵剖番茄茎秆和横切马铃薯薯 块的维管束变色情况。 （4）瘤肿或畸形：观察冠瘿病菌（A．tumefaciens）危害桃树或法国梧桐根冠部引起的冠瘿病。 观察发根病菌（A．rhizogenes）侵染苹果树木根部所引起的发根病标本。观察泡桐丛枝病，腋芽大 量萌发，侧枝丛生；观察枣疯病，芽大量萌发呈丛枝状，花器退化，萼片、花瓣变成叶片状。 2. 植物病原细菌形态观察和种类鉴定 2.1 植物病原细菌培养形状观察 取培养皿中培养的黄瓜角斑病菌、马铃薯环腐病菌，茄青枯病菌和白菜软腐病菌等，注意观察 菌落颜色、大小、质地，是否产生荧光色素等，和植物病原真菌培养菌落有什么根本性的不同? 2.2 革兰氏染色法 （1）在干净的载玻片上用移菌环移菌少许涂片，每人在同一张玻片的两端分别涂上 BS 和 XO 或 CS 和 RS 两个菌株，做好标记。晾干后在火焰上通过两次，固定涂片。 （2）结晶紫染色一分钟。 （3）水洗数秒钟，甩去余下的水，并轻轻吸干（或用碘液冲去余下的水）。 （4）碘液处理一分钟。 （5）水洗数秒钟，用吸水纸吸干，但不能损害菌苔涂片。 （6）用 95％酒精褪色。将载玻片斜放在白纸上，从上端滴下酒精，使其顺着整个载玻片均匀 地向下流，直到洗下的酒精无色为止。褪色时间为 10－20 秒，不能超过 30 秒，否则阳性菌也可能 被褪色。 （7）水洗数秒钟，吸干。 （8）滴加复染剂复染 10 秒钟。 （9）水洗，吸干，镜检，革兰氏阳性菌呈紫色或蓝黑色；阴性菌呈红色。 （四）实验要求 要求学生掌握植物细菌病害的分类鉴定需要特有的实验技术，熟悉植物细菌病害症状类型和病 原细菌的基本形态，学习植物细菌病害简易诊断方法及病原细菌初步鉴定的程序和技术，为以后植 物细菌病害的正确诊断和病原细菌的分类鉴定打下良好的基础。 （五）主要仪器设备 有关病害标本、照片或新鲜材料。病原菌永久玻片和各种类型的子实体标本。显微镜、擦镜纸、 乳酚油、挑针、载玻片、盖玻片、小纱布。 实验五 植物病原线虫的分离和观察 （一）实验类型：验证