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稀碱法:是用氢氧化钠溶液(1%),使细胞壁变 性,使核酸从细胞内释放出来。需用酸中和PH7。然 后除去菌体,将pH调至RNA的等电点(pH25,使 RNA沉淀出来。上法的缺点是制得的RNAM较 低、磷酸单脂酶、磷酸二脂酶降解RNA,90℃保持 3-4h破坏酶)。 浓盐法:是用高浓度盐溶液(6%8%)处理,同 时加热,以改变细胞壁的通透性,使核酸从细胞内 释放出来 要避免分子降解,可采用苯酚法制备RNA。用苯 酚处理生物材料,使蛋白质变性,然后离心,上层水 溶液内含有全部RNA,可用乙醇沉淀出来稀碱法:是用氢氧化钠溶液(1%),使细胞壁变 性,使核酸从细胞内释放出来。需用酸中和PH7。然 后除去菌体,将pH调至RNA的等电点(pH2.5),使 RNA沉淀出来。上法的缺点是制得的RNA Mr较 低,(磷酸单脂酶、磷酸二脂酶降解RNA,90 ℃保持 3~4h破坏酶)。 浓盐法:是用高浓度盐溶液(6%~8%)处理,同 时加热,以改变细胞壁的通透性,使核酸从细胞内 释放出来。 要避免分子降解,可采用苯酚法制备RNA。用苯 酚处理生物材料,使蛋白质变性,然后离心,上层水 溶液内含有全部RNA,可用乙醇沉淀出来
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