般性质 1酸碱性 两性,但酸性强。电泳行为-泳向正极(pH7-8)。 沉淀行为-加盐(中和电荷)M+与磷酸"-"中和;乙醇。 2粘性 粘度DNA>RNA 3溶解性:DNA、RNA微溶于水,不溶于有机溶剂。通常70%乙醇中 可沉淀 4沉降特性:不同构象的核酸密度不同、沉降速度不冋:超离心沉降 5电泳 紫外吸收 260nm紫外吸收峰Pu、Py的共轭双键 1利用OD260/OD28判断核酸样品的纯度 2定量 可以利用260m紫外吸收测量DNA变性程度。在260nm波长,单链 DNA的吸收要比双链DNA的吸收高12~40%,因为双链DNA中堆积的碱 基对之间的相互作用降低了吸收。由核酸变性而引起紫外吸收增加的现象, 称为增色效应。 解链温度\融解温度(Tm)-Uⅴ吸收増值达到最大吸收増值50%时的 温度,称Tm。 DNA解链曲线呈S型,中间有一个拐点,叫做Tm Tm值与DNAG+C含量有关,G+C含量愈大,Tm愈高,反之则反; 与核酸分子长度有关,分子愈长,Tm愈高 、核酸的变性 (一)变性和降解 1.核酸的变性与复性 在一定条件下,DNA双螺旋可以彻底地解链,分离成两条互补的单链, 这种现象称为DNA变性。而分开的两条单链还可以重新形成双螺旋DNA, 称为复性。 变性温度范围与DNA样品均一性有关,分子种类愈纯(单一),长度 愈一致,其变性范围愈窄,反之则变性温度范围愈宽。 降解:多核苷酸链上共价键(3’,5磷酸二酯键)的断裂。 核酸复性时UV下降,此称低色效应 DNA热变性后缓慢冷却处理过程称退火 DNA加热变性后,若经骤然降温,互补链碱基之间来不及配对互补, 形成氢键联系,两链维持分离状态 核酸分子杂交一当不同来源的核酸变性后一起复性时,只要这些核酸 分子中含有相同序列的片段,即可形成碱基配对,出现复性现象,形成杂 种核酸分子,或称杂化双链,称核酸分子杂交一、一般性质 1.酸碱性 两性，但酸性强。 电泳行为--泳向正极（pH7-8）。 沉淀行为--加盐（中和电荷） M+与磷酸"-"中和；乙醇。 2.粘性 粘度 DNA>RNA 3.溶解性：DNA、RNA 微溶于水，不溶于有机溶剂。通常 70%乙醇中 可沉淀。 4.沉降特性：不同构象的核酸密度不同、沉降速度不同：超离心沉降 5.电泳： 二、紫外吸收 260nm 紫外吸收峰 Pu、Py 的共轭双键 1.利用 OD260 /OD280判断核酸样品的纯度 2.定量 可以利用 260nm 紫外吸收测量 DNA 变性程度。在 260nm 波长，单链 DNA 的吸收要比双链 DNA 的吸收高 12~40％，因为双链 DNA 中堆积的碱 基对之间的相互作用降低了吸收。由核酸变性而引起紫外吸收增加的现象， 称为增色效应。 解链温度\融解温度（Tm）--UV 吸收增值达到最大吸收增值 50%时的 温度，称 Tm。 DNA 解链曲线呈 S 型，中间有一个拐点，叫做 Tm Tm 值与 DNA G+C 含量有关，G+C 含量愈大，Tm 愈高，反之则反； 与核酸分子长度有关，分子愈长，Tm 愈高。 三、核酸的变性 （一）变性和降解 1.核酸的变性与复性 在一定条件下，DNA 双螺旋可以彻底地解链，分离成两条互补的单链， 这种现象称为 DNA 变性。而分开的两条单链还可以重新形成双螺旋 DNA， 称为复性。 变性温度范围与 DNA 样品均一性有关，分子种类愈纯（单一），长度 愈一致，其变性范围愈窄，反之则变性温度范围愈宽。 降解：多核苷酸链上共价键（3’,5’磷酸二酯键）的断裂。 核酸复性时 UV 下降，此称低色效应。 DNA 热变性后缓慢冷却处理过程称退火。 DNA 加热变性后，若经骤然降温，互补链碱基之间来不及配对互补， 形成氢键联系，两链维持分离状态。 核酸分子杂交—当不同来源的核酸变性后一起复性时，只要这些核酸 分子中含有相同序列的片段，即可形成碱基配对，出现复性现象，形成杂 种核酸分子，或称杂化双链，称核酸分子杂交