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2、什么情况下转入的DNA会被降解 答:没有保护的结合蛋白或未来得及发生重组 3、影响普遍性转导成功率的因素有哪些? 答:宿主基因组与噬菌体基因组有类似的pac包装识别位点,基因片段大小合适, 包装前没有被全部降解。所以感染噬菌体的时间点和时长很重要 1、沙门氏菌Lτ22A-携带P22噬菌体溶原性;非溶原性(1、无噬菌体生成,控制变 量。2、表型改变,易于观察) 2、ga+转导子不稳定,1-10%a变成ga-,aα交换后形成稳定转导子,而部分二倍 体因转入质粒失去α恢复ga|-表型 此处的整理没有看明白。 1、快转感受态如何制作?为何无需40℃热激及37℃复苏? 答:不太清楚。需要注意快与转化效率不一样。如果转化质粒,其实对感受态的要 求并不高,尤其是有筛选标记时、不要求转化效率时。 噬菌体(满足普遍性转导要求),如何鉴别确定这样的噬菌体?以用作基因工 程工具? 答:通过营养缺陷性受体菌、野生型供体菌和待检测噬菌体,设计转导实验,检测 是否能够获得重组菌。用作基因工程载体的噬菌体都是经过改造的,商业化的。 3、海洋中多为古生菌且变化较慢的原因是什么?(猜想是环境较稳定) 答:可能是。实际上海洋中非古生菌非常多,只是以前没有研究较好古生菌的方法, 所以最新发现了其中存在嗜中温的海洋古生菌。 1、低频转导和高频转导分别适用于?低频转导率高为何还要高频? 答:1)正常转导是低频转导,需要提高重组率时采用高频转导。2)因为后者获得 非常高的重组体。 2、F因子雌性与三种雄性同时存在时,有没有优先级? 答:理论上F+菌株最容易与F-接合,因为现成的、无缺陷的F质粒随之可用。2、 什么情况下转入的 DNA 会被降解? 答:没有保护的结合蛋白或未来得及发生重组。 3、 影响普遍性转导成功率的因素有哪些? 答:宿主基因组与噬菌体基因组有类似的pac包装识别位点,基因片段大小合适, 包装前没有被全部降解。所以感染噬菌体的时间点和时长很重要。 第八组: 1、沙门氏菌 LT22A---携带 P22 噬菌体溶原性;非溶原性(1、无噬菌体生成,控制变 量。2、表型改变,易于观察) 2、gal+转导子不稳定,1-10% α变成 gal-,αα 交换后形成稳定转导子,而部分二倍 体因转入质粒失去 α 恢复 gal-表型。 此处的整理没有看明白。 第九组: 1、 快转感受态如何制作?为何无需 40℃热激及 37℃复苏? 答:不太清楚。需要注意快与转化效率不一样。如果转化质粒,其实对感受态的要 求并不高,尤其是有筛选标记时、不要求转化效率时。 2、 噬菌体(满足普遍性转导要求),如何鉴别确定这样的噬菌体?以用作基因工 程工具? 答:通过营养缺陷性受体菌、野生型供体菌和待检测噬菌体,设计转导实验,检测 是否能够获得重组菌。用作基因工程载体的噬菌体都是经过改造的,商业化的。 3、 海洋中多为古生菌且变化较慢的原因是什么?(猜想是环境较稳定) 答:可能是。实际上海洋中非古生菌非常多,只是以前没有研究较好古生菌的方法, 所以最新发现了其中存在嗜中温的海洋古生菌。 第十组: 1、 低频转导和高频转导分别适用于?低频转导率高为何还要高频? 答:1)正常转导是低频转导,需要提高重组率时采用高频转导。2)因为后者获得 非常高的重组体。 2、 F 因子雌性与三种雄性同时存在时,有没有优先级? 答:理论上 F+菌株最容易与 F-接合,因为现成的、无缺陷的 F 质粒随之可用
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