第一篇组成人体的细胞 第二章基于抗体的细胞化学显示 在生命科学研究领域,抗体已被成功地应用于捕获靶分子(抗原)、亲和层 析纯化蛋白、组织细胞中靶分子定位研究等诸多方向。这些技术所利用的其实就 是抗体与抗原发生特异性结合的特性,所有这些基于抗体的研究技术主要可被分 为四种类型:①利用抗体“示踪”靶分子;②利用抗体去捕获靶分子;③利用抗 体进行蛋白功能学研究;④通过和芯片技术的结合用于蛋白表达谱研究。 第一节抗体的标记 在绝大多数情况下,当抗体分子被应用于研究时均需要被标记。依据实验目 的之不同,所采用的标记方法和标记物通常也是不同的。 抗体的标记的直接法与间接法 (一)直接法 直接法是将纯化后的抗体先与一标记物直接结合,然后再与靶分子(抗原) 结合,通过检测抗体所携带的标记物来对靶分子(抗原)进行定性、定位、定量 测量的方法。 (二)间接法 间接法与直接法不同,抗体既不需纯化也不需标记,而是在抗体与相应靶分 子(抗原)结合后,洗去未结合抗体,然后通过利用己标记好的第二抗体(二抗) 与一抗的结合来间接标记出靶分子(抗原)的存在情况。此方法带有比直接法更 多的标记物,因此较直接法灵敏。 标记物的选择 无论是直接法还是间接法,标记物的选择至关重要。表1-2-1所列出的就是 一些常用标记物及其相应的检测方法和优缺点等。 表1-2-1标记物的选择第一篇 组成人体的细胞 第二章 基于抗体的细胞化学显示 在生命科学研究领域，抗体已被成功地应用于捕获靶分子（抗原）、亲和层 析纯化蛋白、组织细胞中靶分子定位研究等诸多方向。这些技术所利用的其实就 是抗体与抗原发生特异性结合的特性，所有这些基于抗体的研究技术主要可被分 为四种类型：①利用抗体“示踪”靶分子；②利用抗体去捕获靶分子；③利用抗 体进行蛋白功能学研究；④通过和芯片技术的结合用于蛋白表达谱研究。 第一节 抗体的标记 在绝大多数情况下，当抗体分子被应用于研究时均需要被标记。依据实验目 的之不同，所采用的标记方法和标记物通常也是不同的。 一、抗体的标记的直接法与间接法 （一）直接法 直接法是将纯化后的抗体先与一标记物直接结合，然后再与靶分子（抗原） 结合，通过检测抗体所携带的标记物来对靶分子（抗原）进行定性、定位、定量 测量的方法。 （二）间接法 间接法与直接法不同，抗体既不需纯化也不需标记，而是在抗体与相应靶分 子（抗原）结合后，洗去未结合抗体，然后通过利用已标记好的第二抗体（二抗） 与一抗的结合来间接标记出靶分子（抗原）的存在情况。此方法带有比直接法更 多的标记物，因此较直接法灵敏。 二、标记物的选择 无论是直接法还是间接法，标记物的选择至关重要。表 1-2-1 所列出的就是 一些常用标记物及其相应的检测方法和优缺点等。 表 1-2-1 标记物的选择