5期 季必霞等：大花蕙兰多倍体的高效诱导 561 表2二倍体与多倍体大花蕙兰植株外部形态比较 于二倍体。多倍体大花蕙兰气孔的长度、宽度、气 Table 2 Comparison of the external morphology between 孔密度和叶绿体数较其二倍体增加55.8%、 diploid and polyploid 77.2%、-35.5%、110.5%。 性状 二倍体 多倍体 多倍体较二倍 Character Diploid Polyploid 体的倍数 Increased rate(%) 表3二倍体与多倍体大花蕙兰气孔及保卫细胞特征比较 叶片平均长度 Table 3 Comparison of the leaf stomata and guard cell 5.67±0.07 Length of leaf(cm) 3.74±0.04 66.0 features between diploid and polyploid 叶片平均宽度 Breadth of leaf(cm> 0.51±0.02 0.73±0.03 143.1 材料 二倍体 多倍体 多倍体较二倍体 Material Diploid Polyploid 增加的倍数 叶片平均厚度 0.03±0.01 0.05±0.01 166.7 Increased rate(%) Thickness of leaf(cm) 气孔宽度 平均根长 Stomata width(μm） 15.32±0.161 27.14±0.071 77.2 Length of root(cm) 2.97±0.07 1.25±0.05* 42.1 气孔长度 平均株高 Stomata length(μm) 20.67±0.67 32.20±1.2* 55.8 Height of plant(cm) 5.41±0.02 3.04±0.04 56.2 气孔密度 注：叶片性状为平均值±标准差：”p<0.01极显著水平。 Stomata frequency 421±1.581 273±3 -35.5 Note:Leaf characters were means+SD:extremely significant at p<0.01. No./mm2) 叶绿体数目 110.5 2.4大花蕙兰不同倍体叶片气孔特征比较 Number of chloroplasts 15.78±1.01833.22±4.95 由表3、图4可见，在多倍体和二倍体大花蕙 注：气孔特性为平均值±标准差：“p<0.01极显著水平：·p< 兰植株中，气孔长度、气孔宽度、气孔密度间均存在 0.01显著水平。 一定的变异范围，多倍体的气孔长度、宽度和叶绿 Note:Stomata characters were means SD:extremely significant at p<0.01:significant at p<0.01. 体数都显著大于二倍体，但其气孔密度则均显著小 图4大花蕙兰二倍体（左）与多倍体（右）气孔器的比较(×10) Fig.4 Comparison of the stomatal apparatus of diploid left)and polyploid (right) 一个时期后，这种染色体数目加倍了的细胞再分裂 3讨论 增长时，就构成了双倍性的细胞，并在此基础上进 秋水仙素是多倍体诱变常采用的试剂。其作 一步发育成为多倍体植物。秋水仙素诱导在多倍 用机理为：当细胞进行分裂时，一方面能使染色体 体育种中应用广泛，效果显著6-]。 的着丝点延迟分裂，已复制的染色体两条单体分 秋水仙素处理浓度、处理时间和多倍体诱导率 离，而着丝点仍连在一起，形成“X”形染色体图象 不是简单的相关关系。秋水仙素浓度0.05%处理 (称为C-有丝分裂，即秋水仙素效应有丝分 24h时，其诱变效果最佳，可达28.2%。采用秋水 裂1])：另一方面是引起分裂中期的纺锤丝断裂， 仙素浸泡法诱导大花蕙兰多倍体是有效、可行的。 或抑制前期纺锤体的形成，结果到分裂后期染色体 从其他园艺植物利用秋水仙素进行多倍体诱导的 不能移向两极，而重组成一个双倍性的细胞核。此 结果看[18]，不同材料所用的秋水仙素浓度及处 时，细胞加大而不分裂，或者分裂成一个无细胞核 理的时间不尽相同，因此确定处理细胞、器官的最 的子细胞和一个有双倍性细胞核的子细胞。经过 佳秋水仙素处理浓度及处理时间，需要不断探索。l ! [&’@%&’!"#$stJKLMNO #$%&’ ! ()*+$,-.)/ )0 12’ ’31’,/$& *),+2)&)45 %’16’’/ 7-+&)-7 $/7 +)&5+&)-7 ì !"#$#%&’$ ¥€~ ()*+,)- €~ .,+/*+,)- €~½¥€ ~v€¡ 01%$’#2’- $#&（’ 3 ） Ÿ’¥¦Úz 4’15&" ,6 +’#（6 %7） 89 :; < =9 =; >9 ;? < =9 =?!! ::9 = Ÿ’¥¦¢z @$’#-&" ,6 +’#（6 %7） =9 8A < =9 =B =9 ;> < =9 =>!! A?>9 A Ÿ’¥¦£z C")%D1’22 ,6 +’#（6 %7） =9 => < =9 =A =9 =8 < =9 =A A::9 ; ¥¦„Ú 4’15&" ,6 $,,（& %7） B9 E; < =9 =; A9 B8 < =9 =8!! ?B9 A ¥¦-› F’)5"& ,6 *+#1（& %7） 89 ?A < =9 =B >9 =? < =9 =?!! 8:9 B î：Ÿ’ìi¥¦Æ < ´µ¦；!!! G =9 =A Õªƒl¥。 H,&’：4’#6 %"#$#%&’$2 I’$’ 7’#12 < J(；!! ’K&$’7’+/ 2)51)6)%#1& #& ! G=9 =A9 B9 ? !"#$jk&’PQRSuvNO ֕ >、à ? ñò，þ€~„¥€~J^_ ‘!-V，¢£Úz、¢£¢z、¢£óz|¦hþ 0’vp§ôõ，€~v¢£Úz、¢z„Ÿ  ~¡öªƒJ#¥€~，J¢£óz÷¦ªƒ¤ #¥€~。€~J^_‘¢£vÚz、¢z、¢ £óz „ Ÿ   ~ ¡ ½  ¥ € ~ ­  889 M3 、 ;;N B3 、O >89 83 、AA=9 83 。 l 8 [&’@%&’!"#$RSwTUVWuvNO #$%&’ 8 ()*+$,-.)/ )0 12’ &’$0 .1)*$1$ $/7 49$,7 :’&& 0’$19,’. %’16’’/ 7-+&)-7 $/7 +)&5+&)-7 Xj P#&’$)#+ ¥€~ ()*+,)- €~ .,+/*+,)- €~½¥€~ ­v€¡ 01%$’#2’- $#&（’ 3 ） ¢£¢z J&,7#&# I)-&"（!7） A89 >B < =9 A:A B;9 A? < =9 =;A!! ;;9 B ¢£Úz J&,7#&# +’15&"（!7） B=9 :; < =9 :; >B9 B= < A9 B!! 889 M ¢£óz J&,7#&# 6$’QR’1%/ （H,9 S 77B ） ?BA < A9 8MA B;> < >!! O >89 8 Ÿ ~¡( HR7T’$ ,6 %"+,$,*+#2&2 A89 ;M < A9 =AM >>9 BB < ?9 E8! AA=9 8 î：¢£ùi¥¦Æ < ´µ¦；!!! G =9 =A Õªƒl¥；! ! G =N =A ªƒl¥。 H,&’：J&,7#&# %"#$#%&’$2 I’$’ 7’#12 < J(；!! ’K&$’7’+/ 2)51)6)%#1& #& ! G =9 =A；! 2)51)6)%#1& #& ! G =9 =A9 3 ; !"#$[&’（\）@%&’（]）RSx(NO（ < =>） ?-4@ ; ()*+$,-.)/ )0 12’ .1)*$1$& $++$,$19. )0 7-+&)-7（&’01）$/7 +)&5+&)-7（,-421） > yz klmn¯€~opãrsvYq。1 s6xi：Í@AŽ±ä{，0ŠÿøÓ«¬~ vÈùúûü±ä，Doâv«¬~ýÝ~± þ，¶ÈùúÒÿþ0¡，‚!“U”‚«¬~Ã! （" i !V ù ± ä，# k l m n ‘ ï  ù ± ä［A8］ ）；»0Šÿ¯$¡±äVIv%&ù’ä， ()âÍI%&~v‚!，ܱä¨I«¬~ tø*ªýÕ，¶Ãð!0n+€v@A©。× {，@AJ¶t±ä，(2±ä!0nd@A© v,@A„0nÂ+€@A©v,@A。ǁ 0n{I¨，-³«¬~¡(€@v@A.±ä ­Ú{，/7!@+€v@A，Aþ×%eºŽ 00[Ñ!i€~!"。klmno}þ€ ~ѳVïsÉ1，‘ªƒ［A: W A;］ 。 klmnwxyz、wx{|„€~o}š t¯3Ývœ22I。klmnyz =9 =83 wx B? " {，op‘Î3，ñœ BM9 B3 。rskl mn[\‹o}J^_‘€~¯Â‘、ñv。 >·45!"îsklmnŽ€~o}v 6［AM W BB］ ，tuXj×svklmnyzµw xv{|t7œu，à×8’wx@A、()vÎ 3klmnwxyzµwx{|，Ø=t’^_。 8 I 567‰：J^_‘€~v›‘o} 8:A