第五章 培养基及设备的灭菌第一节 培养基灭菌的目的、 要求和方法 一、定义 1,培养基灭菌的定义 是指从培养基中杀灭有生活能力的细菌营养体及其孢子,或从中将其除去。工业规模的 液体培养基灭菌,杀灭杂菌比除去杂菌更为常用。 2,灭菌与消毒的区别 灭菌:用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物,包括营养细胞、细菌芽孢和孢 子 消毒:用物理或化学方法杀死物料、容器、器皿内外的病源微生物。 二、培养基灭菌的目的 1,在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的后果: 生产菌和杂菌同时生长,生产菌丧失生产能力; 在连续发酵过程中,杂菌的生长速度有时会比生产菌生长得更快,结果使发酵罐中以杂 菌为主; 杂菌及其产生的物质,使提取精制发生困难 杂菌会降解目的产物; 杂菌会污染最终产品,杂菌会污染最终产品; 发酵时如污染噬菌体,可使生产菌发生溶菌现象。 2,工业上具体措施包括: (1)使用的培养基和设备须经灭菌; (2)好氧培养中使用的空气应经除菌处理; (3)设备应严密,发酵罐维持正压环境; (4)培养过程中加入的物料应经过灭菌; (5)使用无污染的纯粹种子。 3,培养基灭菌的目的 杀灭培养基中的微生物,为后续发酵过程创造无菌的条件。 4,培养基灭菌的要求 (1)达到要求的无菌程度(10-3) (2)尽量减少营养成分的破坏,在灭菌过程中,培养基组分的破坏,是由两个基本类 型的反应引起的: ⚫ 培养基中不同营养成分间的相互作用; ⚫ 对热不稳定的组分如氨基酸和维生素等的分解。 5,灭菌的方法 (1)化学法 化学药品灭菌法 (2)物理法 干热灭菌法 湿热灭菌法 射线灭菌法