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2017/9/12 ·细胞组分荧光观赛 ·自发荧光:叶绿体(叶绿素), 细胞壁(木质素)· ,次生荧光: 1)荧光染料直这 刀醛费境:使统光未共价结合在特异蛋白质上洗入细胞,管,发 3》免疫炎尖标记用茨光表标记的抗体染持异街响质第抗物质台贺觉篇夏 基因碳行 82017/9/12 8 • 细胞组分荧光观察 • 自发荧光:叶绿体(叶绿素),细胞壁(木质素)。 • 次生荧光: 1)荧光染料直染:吖啶橙(DNA、RNA),DAPI(核、DNA,蓝),PI(核、DNA, 红),羰花青染料(脂类、细胞膜),荧光素(细胞壁),Fluo-3(Ca2+)等。 2)荧光素直接标记 荧光素直接标记:使荧光素共价结合在特异蛋白质上注入细胞 使荧光素共价结合在特异蛋白质上注入细胞。微管、微 丝蛋白荧光标记。 3)免疫荧光标记:用荧光素标记的抗体染特异蛋白质等抗原物质。如微管蛋 白抗体荧光标记,细胞核酸原位杂交中抗生物素(地高辛)蛋白荧光标记。 4)荧光蛋白标记技术:绿色荧光蛋白基因与特异蛋白基因融合在细胞内表达 荧光蛋白标记的特异蛋白,可以检测、跟踪特异蛋白。 15 间接免疫细胞化学 下图:表达绿色荧光蛋白和 红色荧光蛋白的苜蓿中华根 瘤菌Sinorhizobium meliloti吸 附至转基因蒺藜苜蓿 Medicago truncatula (表达 绿色荧光蛋白::踝蛋白融合 蛋白,其标记微丝构成的细 胞骨架 )的根毛上,注意 根毛受细菌结瘤因子(一种 脂几丁寡糖)的影响已显示 老鼠的成纤维细胞 , 荧 微管呈绿色 、微丝 红 脂几丁寡糖)的影响已显示 畸形, 结瘤因子在转录激活 因子Nod D(一种蛋白转录 因子,受类黄酮调控)调控 下合成。 (Dan Gage, http://jb.asm.org) 荧 光 /芭芭拉 左图:蝾 螈 不同结构 ) 红 色 、 核蓝色 16 螈肺细胞的有丝分裂 ( 5个 ,荧光 /阿列克谢
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