实验(三)双向免疫扩散法 双向扩散法( double diffusion)又称琼脂扩散法,是利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反 应,扩散作用使分处两处的抗原和相应抗体相遇,形成抗原一抗体复合物,比例合适时将出 现沉淀现象 实验目的:测定免疫血清的效价 器材与试剂 载玻片 打孔器 3.微量取液器 4.稀释板 5.培养器或带盖培养皿 6.抗原 7.免疫血清(抗血清) 8.琼脂糖(或进口分装琼脂粉) 9.pH72磷酸缓冲生理盐水(PBS)100ml 实验方法 1.琼脂凝胶板的制作 称取6g琼脂粉放入三角瓶中,加入50 ImI PBS,加热溶解成12%的琼脂溶液(冬天则 琼脂的浓度为1%),用5~10ml小量筒量取4ml倾入洁净水平放置的载玻片中,凝固后用打 孔器按图1打孔。 2.抗血清的稀释 采用二倍连续稀释法,先在稀释板的六个孔里加100μd的PBS,然后取等量的抗血清与 第一孔里的PBS混合,从第一孔里吸取100μd加入第二孔中,充分混合,依次类推从而得270 实验(三) 双向免疫扩散法 双向扩散法（double diffusion）又称琼脂扩散法，是利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反 应，扩散作用使分处两处的抗原和相应抗体相遇，形成抗原—抗体复合物，比例合适时将出 现沉淀现象。 一. 实验目的：测定免疫血清的效价 二. 器材与试剂 1. 载玻片 2. 打孔器 3. 微量取液器 4. 稀释板 5. 培养器或带盖培养皿 6. 抗原 7. 免疫血清（抗血清） 8. 琼脂糖（或进口分装琼脂粉） 9. pH 7.2 磷酸缓冲生理盐水（PBS）100ml 三. 实验方法 1. 琼脂凝胶板的制作 称取 0.6g 琼脂粉放入三角瓶中，加入 50ml PBS, 加热溶解成 1.2%的琼脂溶液（冬天则 琼脂的浓度为 1%），用 5~10ml 小量筒量取 4ml 倾入洁净水平放置的载玻片中，凝固后用打 孔器按图 1 打孔。 2. 抗血清的稀释 采用二倍连续稀释法，先在稀释板的六个孔里加 100l 的 PBS，然后取等量的抗血清与 第一孔里的 PBS 混合，从第一孔里吸取 100l 加入第二孔中，充分混合，依次类推从而得