(4)一种蛋白质的溶解度通常会由于另一蛋白质的存在而降低。 (5)沉淀的蛋白质如不能再溶解,就可能已经变性。 (6)对很多酶,丙酮加量在 20%~50%之间,就能产生沉淀。 (7)接近等电点时,以引起沉淀所需加入有机溶剂的量较少。 (8)当溶剂量达到 50%时,则通常只有分子量小于 15000 的蛋白质仍留在溶 液中。 (9)少量中性盐的存在能产生盐溶作用,增加蛋白质在有机溶剂水溶液的溶解 度。 三、等电点沉淀法 1,原理 等电点沉淀法主要利用两性分子上的电中性时溶解度最低,而各种两性分子具 有不同等电点而进行分离的一种方法。 两性分子在处于等电点时的 pH 值,再加上 其他沉淀因素,则很易沉淀析出。 2,等电点沉淀法的优缺点 优点:很多蛋白质的等电点都在偏酸性范围内,而无机酸通常价较廉,井且某 些酸,如磷酸、盐酸和硫酸的应用能为蛋白质类食品所允许。同时,常可直接进行 其他纯化操作,无需将残余的酸除去。 缺点:酸化时,易使蛋白质失活,这是由于蛋白质对低 pH 比较敏感。 第四节 吸附法 在发酵工业的下游加工过程中,吸附法应用于发酵产品的除杂、脱色、有毒物 质和抗生素的提纯精制。 应用选择性吸附法分离精制的产品包括:蛋白质、核酸、酶、抗生素、氨基酸。 一、吸附法的原理 吸附法是利用吸附剂与杂质、色素物质、有毒物质、产品之间分子引力的差异, 从而起到分离的作用。 二、吸附的目的 将产品吸附浓缩于吸附剂上;将杂质、色素等需要从发酵液中去除的物质吸附 于吸附剂上。 三、吸附法的优缺点 1,优点 可不用或少用有机溶剂; 操作简便、安全、设备简单; 生产过程中 pH 变化小,适用于稳定性较差的生化物质。 2,缺点 吸附法选择性差、收率不高。 无机吸附剂性能不稳定,不能连续操作,劳动强度大。(4)一种蛋白质的溶解度通常会由于另一蛋白质的存在而降低。 (5)沉淀的蛋白质如不能再溶解,就可能已经变性。 (6)对很多酶,丙酮加量在 20%~50%之间,就能产生沉淀。 (7)接近等电点时,以引起沉淀所需加入有机溶剂的量较少。 (8)当溶剂量达到 50%时,则通常只有分子量小于 15000 的蛋白质仍留在溶 液中。 (9)少量中性盐的存在能产生盐溶作用,增加蛋白质在有机溶剂水溶液的溶解 度。 三、等电点沉淀法 1,原理 等电点沉淀法主要利用两性分子上的电中性时溶解度最低,而各种两性分子具 有不同等电点而进行分离的一种方法。 两性分子在处于等电点时的 pH 值,再加上 其他沉淀因素,则很易沉淀析出。 2,等电点沉淀法的优缺点 优点:很多蛋白质的等电点都在偏酸性范围内,而无机酸通常价较廉,井且某 些酸,如磷酸、盐酸和硫酸的应用能为蛋白质类食品所允许。同时,常可直接进行 其他纯化操作,无需将残余的酸除去。 缺点:酸化时,易使蛋白质失活,这是由于蛋白质对低 pH 比较敏感。 第四节 吸附法 在发酵工业的下游加工过程中,吸附法应用于发酵产品的除杂、脱色、有毒物 质和抗生素的提纯精制。 应用选择性吸附法分离精制的产品包括:蛋白质、核酸、酶、抗生素、氨基酸。 一、吸附法的原理 吸附法是利用吸附剂与杂质、色素物质、有毒物质、产品之间分子引力的差异, 从而起到分离的作用。 二、吸附的目的 将产品吸附浓缩于吸附剂上;将杂质、色素等需要从发酵液中去除的物质吸附 于吸附剂上。 三、吸附法的优缺点 1,优点 可不用或少用有机溶剂; 操作简便、安全、设备简单; 生产过程中 pH 变化小,适用于稳定性较差的生化物质。 2,缺点 吸附法选择性差、收率不高。 无机吸附剂性能不稳定,不能连续操作,劳动强度大