基因工程原理实验指导 《基因工程原理》实验教学大纲 1.课程名称：基因工程原理 2.课程类别：专业课 3.课程要求：限定选修课 4.课程属性：课内实验 5.课程总学时：48学时 总学分：2.5 6.实验学时：16学时 7.应开实验学期：第6学期 8.适用专业：生物科学、生物技术 9.先修课程：分子生物学、生物化学、生物化学技术原理 一、实验课程简介 基因工程原理实验课程主要是针对生物技术专业、生物科学专业及生物学类 专业研究生而开设的实验课。实验内容涉及分子克隆的一些基本方法及基本操作 技巧，主要包括DNA、RNA及蛋白三个水平的常规操作。 基因克降技术：DNA重组技术是分子生物学的核心内容。本实验利用质粒 载体克隆外源DNA片段，通过这个实验大家可以掌握质粒载体的抽提、外源 DNA的准备、酶切、连接及感受态细胞的制备、连接产物的转化以及阳性克隆 子的鉴定和验证等。 分子杂交技术：实验室常用的分子杂交技术主要有Southern blotting, Northern blotting,Western blotting及Dot blotting等。Southern blotting是通 过用一种或多种限制性内切酶消化基因组或其它来源的DNA,经过琼脂糖凝胶 电泳按大小分离酶切所得的片段，随后DNA在原位发生变性并从凝胶转移到一 固相支持物上（硝酸纤维素膜或尼龙膜）。DNA转移至固相支持物的过程中各 DNA的相对位置保持不变，用一定方法（如放射性同位素）标记的DNA探针与固 着在膜上的DNA杂交，经X光片自显影显现出与探针DNA互补的DNA电泳 条带的位置，然后进行分析。本实验要求掌握植物总DNA的抽提、质量检测、 限制性内切酶操作、DA的琼脂糖凝胶电泳、转膜、探针的制备、同位素操作 等方面的实验技术。 1 基因工程原理实验指导 1 《基因工程原理》实验教学大纲 1．课程名称：基因工程原理 2．课程类别：专业课 3．课程要求：限定选修课 4．课程属性：课内实验 5．课程总学时：48 学时 总学分：2.5 6．实验学时：16 学时 7．应开实验学期：第 6 学期 8. 适用专业： 生物科学、生物技术 9. 先修课程：分子生物学、生物化学、生物化学技术原理 一、实验课程简介 基因工程原理实验课程主要是针对生物技术专业、生物科学专业及生物学类 专业研究生而开设的实验课。实验内容涉及分子克隆的一些基本方法及基本操作 技巧，主要包括 DNA、RNA 及蛋白三个水平的常规操作。 基因克隆技术： DNA 重组技术是分子生物学的核心内容。本实验利用质粒 载体克隆外源 DNA 片段，通过这个实验大家可以掌握质粒载体的抽提、外源 DNA 的准备、酶切、连接及感受态细胞的制备、连接产物的转化以及阳性克隆 子的鉴定和验证等。 分子杂交技术： 实验室常用的分子杂交技术主要有 Southern blotting ， Northern blotting ，Western blotting 及 Dot blotting 等。 Southern blotting 是通 过用一种或多种限制性内切酶消化基因组或其它来源的 DNA，经过琼脂糖凝胶 电泳按大小分离酶切所得的片段，随后 DNA 在原位发生变性并从凝胶转移到一 固相支持物上（硝酸纤维素膜或尼龙膜）。DNA 转移至固相支持物的过程中各 DNA 的相对位置保持不变，用一定方法(如放射性同位素)标记的 DNA 探针与固 着在膜上的 DNA 杂交，经 X-光片自显影显现出与探针 DNA 互补的 DNA 电泳 条带的位置，然后进行分析。 本实验要求掌握植物总 DNA 的抽提、质量检测、 限制性内切酶操作、DNA 的琼脂糖凝胶电泳、转膜、探针的制备、同位素操作 等方面的实验技术