第5卷第1期 自然科学进展国家重点实验室通讯 1995年1月 柑桔原生质体培养与融合研究 邓秀新章文才 (华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,武汉430070) 关键词柑桔原生质体融合体细胞杂种育种 柑桔是我国南方最为重要的水果种类.近些年,生产中存在的病毒病危害以及柑桔北缘 地带的周期性冻害已经给柑桔生产造成了巨大的经济损失.这些问题有待育种工作者去解 决 柑桔育种周期长、占地广,以及长期无性繁殖造成遗传上高度杂合性均影响柑桔有性 杂交与遗传育种研究的开展此外,柑桔类植物的多胚性,即大多数柑桔种类(品种)具有 珠心胚现象.近几十年来由于追求无核性状,致如今生产中的主栽品种大多是雄性 或/和雌性不育类型;这两个特殊困难使得柑洁的有性交工作更难开展有性杂交,这一 在品种改良和性状遗传规律研究中的重要途径在柑桔育种中没能起到应有的作用.对几 十年来注册的柑桔品种进行分析也说明了这一点,柑桔品种有26.1%来自芽变,即一种体 细胞突变;59.4%来自珠心苗变异,实际上还是体细胞突变通过有性杂交选育出来的品 种占的比例很小2,这一育种途径的不畅也妨碍了对柑桔性状遗传规律的认识柑桔遗传研 究落后于其它农作物,因此,开创一条有效途径,使柑桔不同种(品种)间实现基因重组, 一直是柑桔育种者研究的重点.70年代后,植物原生质体培养及融合技术取得的成就为解 决柑桔育种遇到的珠心胚干扰,性器官败育提供了手段本研究自1985年始,首先建立柑 桔原生质体再生技术体系,然后,建立起柑桔原生质体融合及杂种植株再生技术体系,最 后,对这一技术体系进行改进,使之能应用于育种实践本文对已经取得的结果报道如下 1胚性愈伤组织的诱导 胚性愈伤组织是进行柑桔原生质体培养和融合的最佳起始材料.迄今,还没有一例关于 胚性愈伤组织(或悬浮细胞系)之外的原生质体培养再生的报道3~51 柑桔胚性愈伤组织一般是由开花后2~8周的珠心组织诱导产生吴金虎等在M 基本培养基上附加iAA0.1~0.5mg/,kT0.~1.0mg/L,接种开花后7周的珠心组织, 诱导出4个品种的胚性愈伤组织,并发现不同品种产生愈伤组织的能力与该品种每种子含 珠心胚的数目相关,在4个供试品种中,每种子胚数从多到少依次为椪柑、锦橙、桃叶橙和 本地早它们产生胚性愈伤组织的百分比分别为48.5%,21.2%,19.8%和2.2%.对于一些 单胚性种或品种,以及个别的多胚性种,较难获得胚性愈伤组织.如枳(Poncirus trifoliata 19940307收,194-0406收修改稿 国家自然科学基金项目 01994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing house. all rights reserved. http: //www.cnki.net第 卷 第 期 自然科学进展 — 国家重 点实验室通讯 卯 年 月 柑桔原生质体培养与融合研究 邓 秀新 章文才 华中农业大学作物 遗传改 良国家重点 实验室 , 武汉 月义刃 关键词 柑桔 原 生质体融合 体细胞杂种 育种 柑桔是我 国南方最 为重要 的水果种类 近些年 , 生产中存在 的病毒病危害以及 柑桔 北 缘 地带的周 期性 冻害 已 经给柑桔 生产造成 了 巨 大 的 经 济 损失 这 些 问题 有 待 育 种 工 作 者 去解 决 柑桔育种周期 长 、 占地广 , 以及长期无性繁殖造成遗传上高度杂合性 , 均影 响柑桔有 性 杂交 与 遗传育种研究 的开展 此外 , 柑桔类植物 的多 胚性 , 即大 多 数柑 桔 种类 品种 具 有 珠 心 胚 现 象 ’】 近几 十年 来 由于 追 求 无 核性 状 , 致使如今 生 产 中 的 主 栽 品种 大 多 是 雄 性 或 和雌性不育类型 这两个特殊 困难使得柑桔 的有性 杂交工作更难开 展 有性 杂交 , 这 一 在品种改 良和性状遗传规律研究 中的重要途径 , 在柑 桔 育种 中没 能 起到 应 有 的作用 对几 十年来注册 的柑桔品种进行分析也说 明了这一 点 , 柑 桔 品种 有 来 自芽 变 , 即一 种 体 细胞 突变 来 自珠心 苗变异 , 实 际 上 还 是 体细 胞 突变 通 过 有 性 杂交 选 育 出来 的 品 种 占的 比例很小 , 这一育种途 径 的不畅也妨碍 了对柑桔性状遗传规律 的认识 柑桔遗传研 究落后 于 其它农作物 , 因此 , 开创一条 有 效 途 径 , 使柑 桔 不 同种 品种 间实现 基 因重 组 , 一直是柑桔育种者研究 的重 点 年代后 , 植物原 生 质体培 养及 融 合技 术取 得 的成就 为解 决柑桔育种遇到 的珠心胚干扰 , 性器官败育提供 了手段 本研 究 自 年始 , 首 先 建立 柑 桔原生质体再 生技术体系 , 然后 , 建立起 柑 桔 原 生 质体 融 合 及 杂 种 植 株 再 生 技 术体系 最 后 , 对这一技术体系进行改进 , 使之 能应用于育种实践 本文对已 经取得 的结果报道 如下 胚性愈伤组织 的诱导 胚性愈伤组织是进行柑桔 原生质体培养和融合的最佳起始材料 迄今 , 还没有一例关于 胚性 愈伤组织 或悬浮细胞系 之外 的原生质体培养再生 的报道 一 柑桔胚性 愈伤组织一般是 由开花后 一 周 的珠 心 组 织诱 导产 生 昊 金 虎等在 基 本培 养基 上 附加 一 , , 接种 开花后 周 的珠心组织 , 诱导出 个 品种 的胚性愈 伤组织 , 并发现不 同品种 产生 愈伤组 织 的能力 与 该 品种每种子含 珠心胚 的数 目相 关 在 个供试品种 中 , 每种子胚数从多到 少依次为碰柑 、 锦橙 、 桃 叶橙和 本地早 它们产生胚性 愈 伤组 织 的 百 分 比分别 为 , , 和 对于一些 单胚性 种或 品种 , 以及个别 的多 胚 性 种 , 较难 获得 胚性 愈伤组 织 如积 川 她 望辫 一 收稿 , 更阵 , 阵肠 收修改稿 国家 自然科学墓金项 目