3、(2小时)一级液体摇瓶种子:28℃、180rpm培养48小时;并测定细胞活性 4、(2小时)二级液体种子:10%接种量、28℃、180rpm培养48小时;定时取样并测定 细胞活性 5、(17小时)30升罐上培养:10%接种量、28℃、180rm培养48小时;定时取样(6 小时)并测定各发酵参数。纯品小样HPLC制备; 6、(16小时选做)300L罐上培养:10%接种量、28℃、180rpm培养48小时:定时取样 (6小时)并测定各发酵参数。纯品小样HPLC制备; 7、(10小时选做)后处理工艺。 三、测定仪器 1、称量仪器:百分之一电子天平、万分之一电子天平,30公斤台称 2、冷冻离心机,普通离心机,过滤设备、提取浓缩设备 3、分析仪器:可见光分光光度计,HPLC,p计 4、牛津杯:一盒 四、测定指标:S、X、P、pH-t。 实验三霉菌纤维素酶的发酵试验(选做)(17小时) 了解霉菌发酵生产纤维素酶的一般工艺过程;比较不同类型发酵罐的结构及其培养效 果:了解掌握纤维素酶发酵过程控制及参数测定方法;了解发酵后处理工艺特点。 重点内容:微生物酶制剂生产的的一般模式,纤维素酶发酵过程控制及参数测定方法 难点内容:发酵过程控制及参数测定方法 、实验原理 1、机槭搅拌罐通气培养霉菌生产纤维素酶的原理; 2、气升罐通气培养霉菌生产纤维素酶的原理: 3、发酵参数的测定原理 4、酶制剂的硫酸铵沉淀法及超滤浓缩原理: 5、酶活性测定 、实验内容、步骤及时间安排 1、(6小时)培养基配制及灭菌 2、(1小时)斜面种子活化:28℃培养5天 3、(2小时)一级液体摇瓶种子:28℃、180rⅧm培养3天;并测定细胞活性 4、(2小时)二级液体种子:10%接种量、28℃、180rm培养3天;定时取样并测定细 胞活性; 5、(17小时)30升罐上培养:10%接种量、28℃、180rpm培养4天;定时取样(8小时) 并测定各发酵参数 6、(16小时选做)300L罐上培养:10%接种量、28℃、180r培养5天:定时取样(8 http:/spxy.zjgsu.edu.cnhttp://spxy.zjgsu.edu.cn 3、（2 小时）一级液体摇瓶种子：28℃、180rpm 培养 48 小时；并测定细胞活性； 4、（2 小时）二级液体种子：10%接种量、28℃、180rpm 培养 48 小时；定时取样并测定 细胞活性； 5、（17 小时）30 升罐上培养：10%接种量、28℃、180rpm 培养 48 小时；定时取样（6 小时）并测定各发酵参数。纯品小样 HPLC 制备； 6、（16 小时选做）300L 罐上培养：10%接种量、28℃、180rpm 培养 48 小时；定时取样 （6 小时）并测定各发酵参数。纯品小样 HPLC 制备； 7、（10 小时选做）后处理工艺。 三、测定仪器 1、称量仪器：百分之一电子天平、万分之一电子天平，30 公斤台称； 2、冷冻离心机，普通离心机，过滤设备、提取浓缩设备； 3、分析仪器：可见光分光光度计，HPLC，pH 计； 4、牛津杯：一盒； 四、测定指标：S、X、P、pH-t。 实验三 霉菌纤维素酶的发酵试验（选做）（17 小时） 了解霉菌发酵生产纤维素酶的一般工艺过程；比较不同类型发酵罐的结构及其培养效 果；了解掌握纤维素酶发酵过程控制及参数测定方法；了解发酵后处理工艺特点。 重点内容：微生物酶制剂生产的的一般模式，纤维素酶发酵过程控制及参数测定方法 难点内容：发酵过程控制及参数测定方法 一、 实验原理 1、机械搅拌罐通气培养霉菌生产纤维素酶的原理； 2、气升罐通气培养霉菌生产纤维素酶的原理； 3、发酵参数的测定原理； 4、酶制剂的硫酸铵沉淀法及超滤浓缩原理； 5、酶活性测定。 二、实验内容、步骤及时间安排 1、（6 小时）培养基配制及灭菌； 2、（1 小时）斜面种子活化：28℃培养 5 天； 3、（2 小时）一级液体摇瓶种子：28℃、180rpm 培养 3 天；并测定细胞活性； 4、（2 小时）二级液体种子：10%接种量、28℃、180rpm 培养 3 天；定时取样并测定细 胞活性； 5、（17 小时）30 升罐上培养：10%接种量、28℃、180rpm 培养 4 天；定时取样（8 小时） 并测定各发酵参数； 6、（16 小时选做）300L 罐上培养：10%接种量、28℃、180rpm 培养 5 天；定时取样（8