51常用实验室仪器和下列仪器 52紫外分光光度计及10mm石英比色皿。 53医用手提式蒸气灭菌器或家用压力锅(压力为11-~14kg/cm2),锅内温度相当于120℃ 124 54具玻璃磨口塞比色管,25mL。 所用玻璃器皿可以用盐酸(1+9)或硫酸(1+35浸泡,清洗后再用水(4.1)冲洗数次。 6试样制备 61采样 在水样采集后立即放入冰箱或低于4C的条件下保存,但不得超过24h 水样放置时间较长时,可在1000nL水样中加入约05mL硫酸(n=1.84g/mL),酸化到pH 小于2,并尽快测定 样品可贮存在玻璃瓶中。 62试样的制备 取实验室样品(61)用氢氧化钠溶液(43)或硫酸溶液(4.7)调节pH至5~9从而制得 试样 如果试样中不含悬浮物按(7.112)步骤制定,试样中含悬浮物则按(71.3)步骤测定。 7操作步骤 7.1测定 711用无分度吸管取1000nL试样(CN超过100g时,可减少取样量并加水(41)稀释 至10mL)置于比色管中 7.1.2试样不含悬浮物时,按下述步骤进行。 a.加入5mL碱性过硫酸钾溶液(44),塞紧磨口塞用布及绳等方法扎紧瓶塞,以防弹 出 b.将比色管置于医用手提蒸气灭菌器中,加热,使压力表指针到11~14kgm?,此时温 度达120-1240C后开始计时,或将比色管置于家用压力锅中,加热至顶压阀吹气时开 始计时。保持此温度加热半小时 冷却、开阀放气,移去外盖,取出比色管并冷至室温。 d加盐酸(1+9)lmL,用无氨水稀释至25nL标线,混匀 e.移取部分溶液至10mm石英比色皿中,在紫外分光光度计上,以无氨水作参比,分别 在波长为220与275nm处测定吸光度,并用式(1)计算出校正吸光度A 7.1.3试样含悬浮物时,先按上述71.2中a至d步骤进行,然后待澄清后移取上清液到石英 比色皿中,再按上述71.2中e步骤继续进行测定。 72空白试验 空白试验除以10mL水(4.1)代替试料外,采用与测定完全相同的试剂、用量和分析步 骤进行平行操作 注:当测定在接近检测限时,必须控制空白试验的吸光度A不超过003,超过此值,要检查所用 水、试剂、器皿和家用压力锅或医用手提蒸气灭菌器的压力u 73校准 731校准系列的制备: a.用分度吸管向一组(10支)比色管(54)中,分别加入硝酸盐氮标准使用溶液(46,2) 0,0.10,0.30,0.50,0.70,10,3.00,500,700,10.00mL。加水(41)稀释至1000mL。 b.按71.2中a至e步骤进行测定。 732校准曲线的绘制 零浓度(空白)溶液和其他硝酸钾标准使用溶液(462)制得的校准系列完成全部分析 步骤,于波长220和275nm处测定吸光度后,分别按下式求出除零浓度外其他校准系列的校 正吸引光度A和零浓度的校正吸光度Ab,及其差值A2 5.1 常用实验室仪器和下列仪器 5.2 紫外分光光度计及 10mm 石英比色皿 5.3 医用手提式蒸气灭菌器或家用压力锅 压力为 1.1~1.4kg/cm2 锅内温度相当于 120 ~124 5.4 具玻璃磨口塞比色管 25mL 所用玻璃器皿可以用盐酸 1+9 或硫酸 1+35 浸泡 清洗后再用水 4.1 冲洗数次 6 试样制备 6.1 采样 在水样采集后立即放入冰箱或低于 4 的条件下保存 但不得超过 24h 水样放置时间较长时 可在 1000mL 水样中加入约 0.5mL 硫酸 ñ=1.84g/mL 酸化到 pH 小于 2 并尽快测定 样品可贮存在玻璃瓶中 6.2 试样的制备 取实验室样品 6.1 用氢氧化钠溶液 4.3 或硫酸溶液 4.7 调节 pH 至 5~9 从而制得 试样 如果试样中不含悬浮物按 7.1.2 步骤制定 试样中含悬浮物则按 7.1.3 步骤测定 7 操作步骤 7.1 测定 7.1.1 用无分度吸管取 10.00mL 试样 CN 超过 100ìg 时 可减少取样量并加水 4.1 稀释 至 10mL 置于比色管中 7.1.2 试样不含悬浮物时 按下述步骤进行 a. 加入 5mL 碱性过硫酸钾溶液 4.4 塞紧磨口塞用布及绳等方法扎紧瓶塞 以防弹 出 b. 将比色管置于医用手提蒸气灭菌器中 加热 使压力表指针到 1.1~1.4kg/cm2 此时温 度达 120~1240 后开始计时 或将比色管置于家用压力锅中 加热至顶压阀吹气时开 始计时 保持此温度加热半小时 c. 冷却 开阀放气 移去外盖 取出比色管并冷至室温 d. 加盐酸 1+9 1mL 用无氨水稀释至 25mL 标线 混匀 e. 移取部分溶液至 10mm 石英比色皿中 在紫外分光光度计上 以无氨水作参比 分别 在波长为 220 与 275nm 处测定吸光度 并用式 1 计算出校正吸光度 A 7.1.3 试样含悬浮物时 先按上述 7.1.2 中 a 至 d 步骤进行 然后待澄清后移取上清液到石英 比色皿中 再按上述 7.1.2 中 e 步骤继续进行测定 7.2 空白试验 空白试验除以 10mL 水 4.1 代替试料外 采用与测定完全相同的试剂 用量和分析步 骤进行平行操作 注 当测定在接近检测限时 必须控制空白试验的吸光度 Ab 不超过 0.03 超过此值 要检查所用 水 试剂 器皿和家用压力锅或医用手提蒸气灭菌器的压力 7.3 校准 7.3.1 校准系列的制备 a. 用分度吸管向一组 10 支 比色管 5.4 中 分别加入硝酸盐氮标准使用溶液 4.6.2 0 0.10 0.30 0.50 0.70 1.00 3.00 5.00 7.00 10.00mL 加水 4.1 稀释至 10.00mL b. 按 7.1.2 中 a 至 e 步骤进行测定 7.3.2 校准曲线的绘制 零浓度 空白 溶液和其他硝酸钾标准使用溶液 4.6.2 制得的校准系列完成全部分析 步骤 于波长 220 和 275nm 处测定吸光度后 分别按下式求出除零浓度外其他校准系列的校 正吸引光度 As 和零浓度的校正吸光度 Ab 及其差值 Ar