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氨基酸的化学反应 氨基酸和蛋白质分子中的反应基团主要是指它们的氨基,羧基和侧链的反应 基团即巯基、酚羟基、羟基、硫醚基(Met)、咪唑基和胍基,主要反应见表5-6。 其中有的反应可用来对蛋白质和肽进行化学修饰,改善它们的亲水性和疏水性或 功能特性。还有一些反应被用作蛋白质和氨基酸的定量分析,例如氨基酸与茚三 酮、邻苯二甲醛或荧光胺反应是氨基酸定量分析中常用的反应。 1.与茚三酮反应 在氨基酸的分析化学中,具有特殊意义的是氨基酸与茚三酮( Ninhydrin 的反应。茚三酮在弱酸性溶液中与氨基酸共热,生成复合物,大多数是蓝色或紫 色,在570m波长处有最大吸收值。仅脯氨酸和羟基脯氨酸生成黄色产物,λ皿ax 为440nm,上述反应常用于氨基酸的比色(包括荧光法)测定。其反应原理是: R-CH-COoH R-CHo NH3 +3H2O 峁三酮 氨基酸 鲁曼化( Ruhemann’s)紫 2.与荧光胺( fluorescamine)反应 此化合物和一级胺反应生成强荧光衍生物,因而,可用来快速定量测定氨基 酸、肽和蛋白质。此法灵敏度高,激发波长390nm,发射波长475nm R一cH-c。oH H2o 荧光胺 3与1,2-苯二甲醛反应 当有巯基乙醇存在时,1,2-苯二甲醛与氨基酸反应能生成强荧光异吲哚衍 生物(激发波长380nm,发射波长450nm) S一cH2-CH2OH R-CH-COOH 一cooH Hs一cH2-CH2O 巯基乙醇 1,2-苯二甲醛 4.与异硫氰酸苯酯反应二、氨基酸的化学反应 氨基酸和蛋白质分子中的反应基团主要是指它们的氨基,羧基和侧链的反应 基团即巯基、酚羟基、羟基、硫醚基(Met)、咪唑基和胍基,主要反应见表 5-6。 其中有的反应可用来对蛋白质和肽进行化学修饰,改善它们的亲水性和疏水性或 功能特性。还有一些反应被用作蛋白质和氨基酸的定量分析,例如氨基酸与茚三 酮、邻苯二甲醛或荧光胺反应是氨基酸定量分析中常用的反应。 1.与茚三酮反应 在氨基酸的分析化学中,具有特殊意义的是氨基酸与茚三酮(Ninhydrin) 的反应。茚三酮在弱酸性溶液中与氨基酸共热,生成复合物,大多数是蓝色或紫 色,在 570nm 波长处有最大吸收值。仅脯氨酸和羟基脯氨酸生成黄色产物,λmax 为 440nm,上述反应常用于氨基酸的比色(包括荧光法)测定。其反应原理是: 2.与荧光胺(fluorescamine)反应 此化合物和一级胺反应生成强荧光衍生物,因而,可用来快速定量测定氨基 酸、肽和蛋白质。此法灵敏度高,激发波长 390nm,发射波长 475nm。 3.与 1,2-苯二甲醛反应 当有巯基乙醇存在时,1,2-苯二甲醛与氨基酸反应能生成强荧光异吲哚衍 生物(激发波长 380nm,发射波长 450nm)。 4.与异硫氰酸苯酯反应
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