Objective lens Stage Condenser Light Dark-field stop 图2-7暗视野照明方式 (五)、相差显微镜 相差显微镜(phasecontrast microscope,图2-8、9)由P.Zernike于1932年发明， 并因此获1953年诺贝尔物理奖。这种显微镜最大的特点是可以观察未经染色的标本和活细 胞。 相差显微镜的基本原理是，把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结 构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。光线透过标本后发生折射，偏离了原来的光路，同 时被延迟了114入（波长），如果再增加或减少1/4入，则光程差变为1/2入，两束光合轴后干涉 加强，振幅增大或减下，提高反差。在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊 之处： 1.环形光阑(annular diaphragm)位于光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形 成空心光锥，焦聚到标本上。 2.相位板(annular phaseplate)在物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光 的相位推迟114入。分为两种： 1.A*相板：将直射光推迟114入，两组光波合轴后光波相加，振幅加大，标本结构比周 围介质更加变亮，形成亮反差（或称负反差）。图 2-7 暗视野照明方式 （五）、相差显微镜 相差显微镜（phasecontrast microscope，图 2-8、9）由 P．Zernike 于 1932 年发明， 并因此获 1953 年诺贝尔物理奖。这种显微镜最大的特点是可以观察未经染色的标本和活细 胞。 相差显微镜的基本原理是，把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结 构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。光线透过标本后发生折射，偏离了原来的光路，同 时被延迟了 1/4λ（波长），如果再增加或减少 1/4λ，则光程差变为 1/2λ，两束光合轴后干涉 加强，振幅增大或减下，提高反差。在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊 之处： 1. 环形光阑（annular diaphragm） 位于光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形 成空心光锥，焦聚到标本上。 2. 相位板（annular phaseplate）在物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光 的相位推迟 1/4λ。分为两种： 1. A+相板：将直射光推迟 1/4λ，两组光波合轴后光波相加，振幅加大，标本结构比周 围介质更加变亮，形成亮反差（或称负反差）