半乳糖苷酶的蓝/白斑 筛选系统 Unpurified PCR product Ligate into pT-Adv 在质粒中含有LacZ基因的 a-肽的序列，当无外源DNA片段 插入时，质粒表达α-肽，它与 Col El 宿主菌的Lac ZM15基因的产物互 pT-Adv on 补，产生有活性的B-半乳糖苷 3.9kb Kan 酶，在含有指示剂X-ga|和诱导 剂IPTG存在的情况下，菌落呈蓝 Transform TOP10F cells plate on 色（质粒自身环化）；外源基因 LB/X-gal/PTG with amp or kan 插入后，肽基因阅读框架被破坏 细菌内无半乳糖苷酶活性存在 菌落呈白色（阳性克隆）半乳糖苷酶的蓝/白斑 筛选系统 在质粒中含有LacZ基因的 α-肽的序列，当无外源DNA片段 插入时，质粒表达α-肽，它与 宿主菌的Lac ZM15基因的产物互 补，产生有活性的β-半乳糖苷 酶，在含有指示剂X-gal和诱导 剂IPTG存在的情况下，菌落呈蓝 色（质粒自身环化）；外源基因 插入后，肽基因阅读框架被破坏 ，细菌内无半乳糖苷酶活性存在 ，菌落呈白色（阳性克隆）