通过对 CRISPR系统中起引导作用的 Guide rna进行人工设计,我们便可利用它的基因剪切技术 实现一系列基因编辑操作。 三.技术应用 1.基因编辑 我们可以通过 CRISPR-Cas9技术进行基因定向敲除,插入操作,与传统技术相比具有可靠、 高效、快速的特点。通过在互联网上进行查询,可以发现: CRISPR-Cas9技术正在在科研和 医疗领域大放异彩: Nature子刊:首次利用 CRISPR/Cas9在体内成功切除 HIV DNA片段 Nature子刊:利用 CRISPR/Cas9清除人T细胞基因组中的HIV-1 cell:利用 CRISPR/Cas9系统精确标记发育大脑中的内源性蛋白 Cel1:开发出低成本的基于 CRISPR/Cas9的纸片诊断系统快速检测寨卡病毒 Nature:科学家利用 CRISPR-Cas9技术成功构建出细胞疾病模型 2.基因组学研究 CRISPR-Cas9技术与高通量DNA测序的结合也可进行功能基因组学研究。一些研究者已经通过 CRISPR-Cas9技术建立可能与某类功能相关的突变体库,通过功能性筛选和富集,PCR扩增及深 度测序分析,确认与这类功能相关的基因。[1] Hsu P D, Lander E S, Zhang F. Development and applications of CRISPR-Cas 9 for genome engineering[J.Ce11,2014,157(6):1262-1278 四.技术优缺点 1.优点: 与传统基因编辑技术相比较, CRISPR-Cas9技术具有成本低廉,准确性高,操作方便的 优点,具有极大的应用前景。 2.缺点: 目前 CRISPR-Cas9技术的脱靶问题比较严重,如果此问题不能得到妥善解决,则将 CRISPR-Cas9技术应用于人类遗传病治疗等与人体相关的操作仍将面临较大风险。通过对 CRISPR 系统中起引导作用的 Guide RNA 进行人工设计，我们便可利用它的基因剪切技术 实现一系列基因编辑操作。 三． 技术应用 1. 基因编辑 我们可以通过 CRISPR-Cas9 技术进行基因定向敲除，插入操作，与传统技术相比具有可靠、 高效、快速的特点。通过在互联网上进行查询，可以发现：CRISPR-Cas9 技术正在在科研和 医疗领域大放异彩： Nature 子刊：首次利用 CRISPR/Cas9 在体内成功切除 HIV DNA 片段 Nature 子刊：利用 CRISPR/Cas9 清除人 T 细胞基因组中的 HIV-1 Cell：利用 CRISPR/Cas9 系统精确标记发育大脑中的内源性蛋白 Cell：开发出低成本的基于 CRISPR/Cas9 的纸片诊断系统快速检测寨卡病毒 Nature：科学家利用 CRISPR-Cas9 技术成功构建出细胞疾病模型 2. 基因组学研究 CRISPR-Cas9 技术与高通量 DNA 测序的结合也可进行功能基因组学研究。一些研究者已经通过 CRISPR-Cas9 技术建立可能与某类功能相关的突变体库，通过功能性筛选和富集，PCR 扩增及深 度测序分析，确认与这类功能相关的基因。[1] Hsu P D, Lander E S, Zhang F. Development and applications of CRISPR-Cas9 for genome engineering[J]. Cell, 2014, 157(6): 1262-1278. 四． 技术优缺点 1. 优点： 与传统基因编辑技术相比较，CRISPR-Cas9 技术具有成本低廉，准确性高，操作方便的 优点，具有极大的应用前景。 2. 缺点： 目前 CRISPR-Cas9 技术的脱靶问题比较严重，如果此问题不能得到妥善解决，则将 CRISPR-Cas9 技术应用于人类遗传病治疗等与人体相关的操作仍将面临较大风险