实验四细菌增殖曲线的测定 实验 通过细菌数量的测量了解大肠杆菌的生物特征和规律,绘制生长曲线图 实验原理 大多数细菌的繁殖速率很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每20mln分 裂一次。将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、 对数期、稳定期和衰亡期四个阶段。以培养时间为横坐标,以细菌数目的对数或生长速率为 纵坐标作图所绘制的曲线称为该细菌的生长曲线。不同的细菌在相同的培养条件下其生长曲 线不同,同样的细菌在不同的培养条件下所绘制的生长曲线也不相同。测定细菌的生长曲线, 了解其生长繁殖规律,这对人们根据不同的需要,有效地利用和控制细菌的生长具有重要意 菌种与培养基 菌种:大肠杆菌 种子培养基:牛肉膏蛋白胨培养基 发酵培养基:葡萄糖2g/L,Nacl2g/L,Na2HPO41.6g/L,(NH4)2SO4l.6g/L,调pH至 7.2 四.仪器 光电比色计,摇床,冰箱 五.操作步骤 1、将在种子培养基中培养20h的培养液3000pm离心lomi倾去上层液,加入无菌的 生理盐水,成均匀液,细胞数系10/m1 2.取⑩0个盛发酵培养液的三角瓶,各接3ml菌液作种子,在摇床上相同位置30℃振 荡培养,并立即取下一瓶为0时的增殖状态.之后于培养1、2、3、4、5、6、7、8、9各取 瓶,约9个间隔的菌液分别吸取5m1菌于无菌试管中,置4℃下保存。 3.用没接种的培养液为空白对照,将上述菌液于波长600mm处比色,但要求消光度在 03一0.6之间,若超过,用未接种培养液适当稀释。 六.实验结果 1.结果 (1)将测定的OD60值填入下表 培养时间(h)对照01.534567891012 光密度值OD60 (2)以菌悬液0D值为纵坐标,培养时间为横坐标,绘出大肠杆菌培养的增殖曲线.实验四 细菌增殖曲线的测定 一．实验目的： 通过细菌数量的测量了解大肠杆菌的生物特征和规律，绘制生长曲线图 二．实验原理 大多数细菌的繁殖速率很快，在合适的条件下，一定时期的大肠杆菌细胞每 20mln 分 裂一次。将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中，在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、 对数期、稳定期和衰亡期四个阶段。以培养时间为横坐标，以细菌数目的对数或生长速率为 纵坐标作图所绘制的曲线称为该细菌的生长曲线。不同的细菌在相同的培养条件下其生长曲 线不同，同样的细菌在不同的培养条件下所绘制的生长曲线也不相同。测定细菌的生长曲线， 了解其生长繁殖规律，这对人们根据不同的需要，有效地利用和控制细菌的生长具有重要意 义。 三．菌种与培养基 菌种：大肠杆菌 种子培养基：牛肉膏蛋白胨培养基 发酵培养基：葡萄糖 2g/L，Nacl 2g/L，Na2HPO4 1.6 g/L， (NH4)2SO4 1.6g/L，调 pH 至 7.2。 四．仪器 光电比色计，摇床，冰箱 五．操作步骤 1、将在种子培养基中培养 20 h 的培养液 3000rpm 离心 10min 倾去上层液，加入无菌的 生理盐水，成均匀液，细胞数系 109 /m1。 2．取 10 个盛发酵培养液的三角瓶，各接 3m1 菌液作种子，在摇床上相同位置 30℃振 荡培养，并立即取下一瓶为 0 时的增殖状态．之后于培养 1、2、3、4、5、6、7、8、9 各取 一瓶，约 9 个间隔的菌液分别吸取 5m1 菌于无菌试管中，置 4℃下保存。 3．用没接种的培养液为空白对照，将上述菌液于波长 600nm 处比色，但要求消光度在 0.3 一 0.6 之间，若超过，用未接种培养液适当稀释。 六．实验结果： 1．结果 (1) 将测定的 OD600 值填入下表 培养时间（h） 对照 0 1.5 3 4 5 6 7 8 9 10 12 光密度值 OD600 （2）以菌悬液 0D 值为纵坐标，培养时间为横坐标，绘出大肠杆菌培养的增殖曲线．