OD600 培养时间(h) 七.思考题 1)如果用活菌计数法制作生长线,你认为会有什么不同两者各有什么优缺点 (2)细菌生长繁殖所经历的四个时期中,哪个时期其代时最短若细胞密度为10/m1,培 养45h后,其密度高达2X103/m,请计算出其代时。 (3)次生代谢产物的大量积累在哪个时期根据细菌生长繁殖的规律,采用哪些措施可使 次生代谢产物积累更多? 实验五木莓T6淀粉酶的固态发酵实验 实验目的 了解和掌握木霉T6菌株在发酵过程中淀粉酶活力、还原糖和蛋白质浓度的时间变化曲 线和测定方法。 2.基本原理 淀粉酶有催化淀粉水解的作用,能从淀粉分子非还原性末端开始,分解a-1,4一葡萄 糖苷键生成葡萄糖。在碱性条件下,还原糖与3、5一二硝基水杨酸共热,3、5一二硝基水 杨酸被还原为3一氨基一5一硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其它物质 在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度呈一定的比例关系,可在722型分 光光度计540nm波长测定棕红色物质的吸光度值。查标准曲线计算,可求出发酵液中还原 糖的含量,从而求出淀粉酶的活力 3.培养基 培养基(250mL):麸皮7g,面粉0.5g,NaNO30.15g,营养盐6.5mL,pH自然 营养盐配方(g/L):KH2PO430;(NH4)SO42.0;:Cacl20.5:MgSO4 FeSO4.7H2O0.0075;ZnSO40.002;pH5~6 四.实验方法: 1.还原糖的测定 (1)标准曲线的制作 取9支干燥试管,编号,按下表所示的量,精确浓度为100mg/ml的葡萄糖标准液和3 二硝基水杨酸试剂。表中单位为ml七．思考题 (1) 如果用活菌计数法制作生长曲线，你认为会有什么不同?两者各有什么优缺点? (2) 细菌生长繁殖所经历的四个时期中，哪个时期其代时最短?若细胞密度为 103／m1，培 养 4.5h 后，其密度高达 2×108／m 3，请计算出其代时。 (3) 次生代谢产物的大量积累在哪个时期?根据细菌生长繁殖的规律，采用哪些措施可使 次生代谢产物积累更多？ 实验五 木霉 T6 淀粉酶的固态发酵实验 1．实验目的 了解和掌握木霉 T6 菌株在发酵过程中淀粉酶活力、还原糖和蛋白质浓度的时间变化曲 线和测定方法。 2． 基本原理 淀粉酶有催化淀粉水解的作用，能从淀粉分子非还原性末端开始，分解 a－1，4－葡萄 糖苷键生成葡萄糖。在碱性条件下，还原糖与 3、5－二硝基水杨酸共热，3、5－二硝基水 杨酸被还原为 3－氨基－5－硝基水杨酸（棕红色物质），还原糖则被氧化成糖酸及其它物质。 在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度呈一定的比例关系，可在 722 型分 光光度计 540 nm 波长测定棕红色物质的吸光度值。查标准曲线计算，可求出发酵液中还原 糖的含量，从而求出淀粉酶的活力。 3．培养基 培养基（250mL）：麸皮 7g ，面粉 0.5g，NaNO3 0.15g，营养盐 6.5mL，pH 自然。 营养盐配方（g/L）：KH2PO4 3.0；(NH4)2SO4 2.0；Cacl2 0.5；MgSO4.7H2O 0.5；Cocl2 0.003； FeSO4 .7H2O 0.0075；ZnSO4 0.002； pH5~6。 四．实验方法： 1．还原糖的测定 （1）标准曲线的制作 取 9 支干燥试管，编号，按下表所示的量，精确浓度为 1.00 mg/ml 的葡萄糖标准液和 3， 5－二硝基水杨酸试剂。表中单位为 ml。 培养时间（h） OD600 值 0