实验技术 常用细菌培养基制备 感染性疾病的诊断关键在于病原菌的分离与鉴定,人工培养法为细菌提供必 要的生长条件,使其在体外生长繁殖。本章着重介绍常用细菌培养基的制备、细 菌的接种方法及生化反应鉴定法,最后简介了内毒素的检测。要求同学们了解培 养基的制作原则和方法,掌握细菌的分离培养技术 培养基是指在人工培养细菌时,提供给细菌生长繁殖所必需的营养物质的制 品。基础培养基中所含的营养物质能满足一般病原菌生长繁殖所需的氮源、碳源 和无杋盐等。在基础培养基的基础上添加一些特殊成分(如糖类、血液、抑制剂 等)则可制成营养培养基、鉴别培养基和选择培养基等 (一)肉汤培养基 肉汤培养基是常用的液体培养基,也是制备常用的细菌分离培养基及其他某些培 养基的基础 【材料】 鲜牛肉(去脂肪和肌腱)、蛋白胨、氯化钠、pH试纸、10%碳酸氢钠、试管 角烧瓶、蒸馏水等。 【方法】 1.将新鲜牛肉500g切碎或搅碎,加水100mn,放4℃冰箱或冷处浸泡过夜,然 后煮沸30min,放凉,使残余的脂肪凝固,再用绒布或滤纸过滤,将滤液补足为 原量。此溶液称为肉水或肉浸液 2.1000ml肉水中加入蛋白胨10g、氯化钠5g,加热溶解,放凉。 3.用精密pH试纸测酸碱度,用10%碳酸氢钠校正p为72左右。过碱时,可 用10%醋酸校正之。 4.分装于试管中或三角烧瓶中,15磅(121℃高压蒸气灭菌20~30min 如用市售的牛肉膏代替新鲜肉水时,可将牛肉膏溶成0.3~0.5%的水溶液,再如 上法制成培养基 (二)普通琼脂培养基 普通琼脂培养基是常用的固体培养基,包括普通琼脂平板和普通琼脂斜面两种, 前者用于分离纯种细菌,后者用于增殖纯种细菌或保存菌种 【材料】 ①肉水200ml实验技术 一、常用细菌培养基制备 感染性疾病的诊断关键在于病原菌的分离与鉴定，人工培养法为细菌提供必 要的生长条件，使其在体外生长繁殖。本章着重介绍常用细菌培养基的制备、细 菌的接种方法及生化反应鉴定法，最后简介了内毒素的检测。要求同学们了解培 养基的制作原则和方法，掌握细菌的分离培养技术。 培养基是指在人工培养细菌时，提供给细菌生长繁殖所必需的营养物质的制 品。基础培养基中所含的营养物质能满足一般病原菌生长繁殖所需的氮源、碳源 和无机盐等。在基础培养基的基础上添加一些特殊成分（如糖类、血液、抑制剂 等）则可制成营养培养基、鉴别培养基和选择培养基等。 (一)肉汤培养基 肉汤培养基是常用的液体培养基，也是制备常用的细菌分离培养基及其他某些培 养基的基础。 【材料】 鲜牛肉(去脂肪和肌腱)、蛋白胨、氯化钠、pH 试纸、10％碳酸氢钠、试管、三 角烧瓶、蒸馏水等。 【方法】 1．将新鲜牛肉 500g 切碎或搅碎，加水 1000ml，放 4℃冰箱或冷处浸泡过夜，然 后煮沸 30min，放凉，使残余的脂肪凝固，再用绒布或滤纸过滤，将滤液补足为 原量。此溶液称为肉水或肉浸液。 2．1000ml 肉水中加入蛋白胨 10g、氯化钠 5g，加热溶解，放凉。 3．用精密 pH 试纸测酸碱度，用 10％碳酸氢钠校正 pH 为 7.2 左右。过碱时，可 用 10％醋酸校正之。 4．分装于试管中或三角烧瓶中，15 磅(121℃)高压蒸气灭菌 20～30min。 如用市售的牛肉膏代替新鲜肉水时，可将牛肉膏溶成 0.3～0.5％的水溶液，再如 上法制成培养基。 (二)普通琼脂培养基 普通琼脂培养基是常用的固体培养基，包括普通琼脂平板和普通琼脂斜面两种， 前者用于分离纯种细菌，后者用于增殖纯种细菌或保存菌种。 【材料】 ① 肉水 200ml