量为0.5mg/ml胶液 4. TEMED:胶液中的加入量为lμul/mnl胶液 5.蛋白质样品:选用两种等电点相差较大的蛋白质,每根垂直管中每种蛋白质的加 样量控制在<100ug。蛋白质样品配制成各为5mgm的浓度。配2.5ml全班公用。 6.固定液:10%的三氯乙酸,每组配50ml。 7.阳极电极液:0.1MH3PO4 34ml浓磷酸(85%)加H2O至500m,每个电泳槽用500ml。 8.阴极电极液:0.5 M NaOh 2 g NaOh加H2O溶解至500m,每个电泳槽用500ml。 六、操作步骤 1.配胶 校浓度 5.0% 4.8% 5.0% 胶液总体积 10ml 12ml 丙烯酰胺贮液 1.33ml 1.60ml 2.0ml Ampholi 0.40ml 0.50ml 0.60ml TEMED 0.008m 00l0m 0.012m 蛋白质样品 0.080ml 0.100ml 0.120ml 过硫酸铵(1mgml) 4.0ml 6.0ml 装管数 胶浓度了丙烯酰胺贮液浓度x贮液加入量×100% 胶液总体积 交联度C 胶液中甲叉双丙烯酰胺的量b 100 胶液中丙烯酰胺的量a+甲叉双丙烯酰胺的量b 交联度C 0.8 ×100%=26% 30+0.8 过硫酸铵是胶聚合的催化剂,因此最后加入,加毕,立即摇匀,因胶很快就会聚合, 必须立即装管。通常化学聚合的胶液,需在过硫酸铵加入前进行减压抽气处理,本实验 将此抽气步骤省略并不影响实验结果 2.装管 每个学生装两支管,每组装四支。先用肥皂洗手,然后将圆盘电泳槽的玻璃管洗净, 底端用塑料薄膜和橡皮筋封口,垂直放在试管架上,用移液管将配好的胶液移入管内 (每根玻璃管的容量约为1.5~18ml),液面加至距管口lmm处,用注射器轻轻加入少许186 量为 0.5mg/ml 胶液。 4. TEMED：胶液中的加入量为 1l/ml 胶液。 5. 蛋白质样品：选用两种等电点相差较大的蛋白质，每根垂直管中每种蛋白质的加 样量控制在<100g。蛋白质样品配制成各为 5mg/ml 的浓度。配 2.5ml 全班公用。 6. 固定液：10%的三氯乙酸，每组配 50ml。 7. 阳极电极液：0.1M H3PO4 3.4ml 浓磷酸（85%）加 H2O 至 500ml，每个电泳槽用 500ml。 8. 阴极电极液：0.5M NaOH 2g NaOH 加 H2O 溶解至 500ml，每个电泳槽用 500ml。 六、操作步骤 1. 配胶 胶浓度 5.0% 4.8% 5.0% 胶液总体积 8ml 10ml 12ml 丙烯酰胺贮液 1.33ml 1.60ml 2.0ml Ampholine 0.40ml 0.50ml 0.60ml TEMED 0.008ml 0.010ml 0.012ml 蛋白质样品 0.080ml 0.100ml 0.120ml H2O 2.26ml 2.79ml 3.27ml 过硫酸铵(1mg/ml) 4.0ml 5.0ml 6.0ml 装管数 4 支 5 支 6 支 过硫酸铵是胶聚合的催化剂，因此最后加入，加毕，立即摇匀，因胶很快就会聚合， 必须立即装管。通常化学聚合的胶液，需在过硫酸铵加入前进行减压抽气处理，本实验 将此抽气步骤省略并不影响实验结果。 2. 装管 每个学生装两支管，每组装四支。先用肥皂洗手，然后将圆盘电泳槽的玻璃管洗净， 底端用塑料薄膜和橡皮筋封口，垂直放在试管架上，用移液管将配好的胶液移入管内， （每根玻璃管的容量约为 1.5~1.8ml）,液面加至距管口 1mm 处，用注射器轻轻加入少许 100%  = 胶液总体积 丙烯酰胺贮液浓度 贮液加入量 胶浓度T 100% + = a b b C 胶液中丙烯酰胺的量 甲叉双丙烯酰胺的量 胶液中甲叉双丙烯酰胺的量 交联度 100% 2.6% 30 0.8 0.8  = + 交联度C =