二、实验准备一—试剂配制or购买 培养基 不同细胞有不同的适合培养基,养细胞前需查清楚。大多数培养基中使 用酚红作为pH指示剂红色代表中性,黄色代表酸性,紫色代表碱性。 很多细胞的培养基中需要加入血清:血清最好放置在-20℃,解冻时应 先置于4℃融解,融解过程必须规则摇晃均匀。(思考:血清是否应该灭活?) 此次实验为RPM1640完全培养基(需添加5% NaHco3,小牛血清, 霉素,链霉素和谷氨酰胺) 缓冲液 -一—磷酸盐溶液( Phosphate Buffered Saline,PBS)、 Hanks液orD- Hanks 液 消化液 可以使用0.25%胰酶、0.05%胰酶 for edta溶液;若胰酶是自己配制,则 要用不含钙、镁离子及血清的平衡盐溶液。 添加剂 谷氨酰胺:合成培养基中都含有较大量的谷氨酰胺,作为核酸和蛋白质 的合成原料;注意:其在溶液中很不稳定,4℃仅能存放两周。 HEPES:羟乙基哌嗪乙硫磺酸,用于防止培养基p迅速变动。二、实验准备——试剂配制or购买 • 培养基 ——不同细胞有不同的适合培养基，养细胞前需查清楚。大多数培养基中使 用酚红作为pH指示剂红色代表中性，黄色代表酸性，紫色代表碱性。 ——很多细胞的培养基中需要加入血清：血清最好放置在-20℃，解冻时应 先置于4℃融解，融解过程必须规则摇晃均匀。（思考：血清是否应该灭活？） ——此次实验为RPMl1640完全培养基（需添加5％NaHCO3，小牛血清， 青霉素，链霉素和谷氨酰胺）。 • 缓冲液 ——磷酸盐溶液（Phosphate Buffered Saline,PBS）、Hanks液or D-Hanks 液 • 消化液 ——可以使用0.25%胰酶、0.05%胰酶or EDTA溶液；若胰酶是自己配制，则 要用不含钙、镁离子及血清的平衡盐溶液。 • 添加剂 ——谷氨酰胺：合成培养基中都含有较大量的谷氨酰胺，作为核酸和蛋白质 的合成原料；注意：其在溶液中很不稳定，4℃仅能存放两周。 ——HEPES：羟乙基哌嗪乙硫磺酸，用于防止培养基pH迅速变动