位，因而在免疫学检测和抗体药物领域具有更大的应用开发潜力 4.单克隆抗体的应用 单克隆抗体在生命科学研究领域中应用极为广泛，包括细胞受体的表达及结构研究 细胞的分类、未知蛋白的功能研究、细胞内的表达定位、新基因的克隆及其表达产物的 鉴定、微生物的分型、临床各类感染性疾病的诊断、细胞内某些特异表达产物的测定及 单抗作为药物在人体内的应用等。 三、学习重点和难点 重点：鼠源单克隆抗体的制备方法、流程。 难点：鼠源单克隆抗体的原理。 四、教学方法 自主学习3学时+课堂翻转3学时。 第五章基因工程抗体 一、目的和要求 掌握鼠单抗人源化的基本方法：掌握小分子抗体、双（多）价及双特异抗体分子、 抗体融合蛋白的基本概念及应用：了解上述各种抗体分子的构建策略。 二、主要内容 1.基因工程抗体的定义 从基因工程抗体的制备与传统免疫学天然抗体进行对比介绍基因工程抗体的特点 和定义。 2.特异性抗体基因的获取 通过用RT-PCR方法从单克隆抗体细胞的mRNA中扩增VH及VL基因以及用探针或者 PCR从基因组文库中钓取两种思路介绍获得特异性抗体基因的方法。 3.鼠单抗人源化 分为恒定区的人源化和可变区的人源化，前者操作简便，但人源化程度稍低，后者 技术难度较大，但人源化程度较高。抗体库技术的出现为人源化提供了新的手段，但技 术路线尚需进一步成熟： 4.小分子抗体 介绍抗体小型化的必要性，以及小分子抗体的定义和特点。分子量较小的具有抗原 结合功能的分子片段，称为小分子抗体。其优点为分子量小、穿透性强、易于构建及表 达，主要包括Fab、ScFv、dsFv及单区抗体等。以纳米抗体的制备和应用作为例子介绍 小分子抗体的发展方向和优势。 5.双（多）价及双特异抗体分子 增加抗体的结合价可提高抗体的生物学性能，双特异抗体可产生特殊的生物学效应， 具有良好的应用前景。其构建方式多种多样。 6.抗体整合物和抗体融合蛋白位，因而在免疫学检测和抗体药物领域具有更大的应用开发潜力。 ⒋ 单克隆抗体的应用 单克隆抗体在生命科学研究领域中应用极为广泛，包括细胞受体的表达及结构研究、 细胞的分类、未知蛋白的功能研究、细胞内的表达定位、新基因的克隆及其表达产物的 鉴定、微生物的分型、临床各类感染性疾病的诊断、细胞内某些特异表达产物的测定及 单抗作为药物在人体内的应用等。 三、学习重点和难点 重点：鼠源单克隆抗体的制备方法、流程。 难点：鼠源单克隆抗体的原理。 四、教学方法 自主学习 3 学时+课堂翻转 3 学时。 第五章 基因工程抗体 一、目的和要求 掌握鼠单抗人源化的基本方法；掌握小分子抗体、双（多）价及双特异抗体分子、 抗体融合蛋白的基本概念及应用；了解上述各种抗体分子的构建策略。 二、主要内容 ⒈ 基因工程抗体的定义 从基因工程抗体的制备与传统免疫学天然抗体进行对比介绍基因工程抗体的特点 和定义。 ⒉ 特异性抗体基因的获取 通过用 RT-PCR 方法从单克隆抗体细胞的 mRNA 中扩增 VH 及 VL 基因以及用探针或者 PCR 从基因组文库中钓取两种思路介绍获得特异性抗体基因的方法。 ⒊ 鼠单抗人源化 分为恒定区的人源化和可变区的人源化，前者操作简便，但人源化程度稍低，后者 技术难度较大，但人源化程度较高。抗体库技术的出现为人源化提供了新的手段，但技 术路线尚需进一步成熟。 ⒋ 小分子抗体 介绍抗体小型化的必要性，以及小分子抗体的定义和特点。分子量较小的具有抗原 结合功能的分子片段，称为小分子抗体。其优点为分子量小、穿透性强、易于构建及表 达，主要包括 Fab、ScFv、dsFv 及单区抗体等。以纳米抗体的制备和应用作为例子介绍 小分子抗体的发展方向和优势。 ⒌ 双（多）价及双特异抗体分子 增加抗体的结合价可提高抗体的生物学性能，双特异抗体可产生特殊的生物学效应， 具有良好的应用前景。其构建方式多种多样。 ⒍ 抗体螯合物和抗体融合蛋白