包括抗体和生物大分子和化学分子鳌合形成具有特殊功能的分子导弹以及包括含 Fv段的融合蛋白和F℃段的融合蛋白，前者主要用于免疫靶向，将选择的生物学活性靶 向至特定的部位，也可用于免疫桥连或构建嵌合受体。后者称为免疫粘附素，在科学研 究和临床治疗中均有应用价值。 三、学习重点和难点 重点：各种基因工程抗体的基本概念及应用： 难点：鼠单抗人源化的基本方法。 四、教学方法 课堂讲授9学时。 第六章抗体库技术 一、目的和要求 掌握噬菌体抗体库制备及筛选的基本技术：熟悉大容量抗体库的概念与类型；了解 抗体库技术的主要应用方向。 二、主要内容 1.抗体库的技术基础和基本内涵 抗体库技术是90年代抗体工程领域的重大进展，它的出现有赖于PCR技术的建立、 抗体分子在大肠杆菌的功能性表达以及噬菌体展示技术的发展。初期的抗体库是利用λ 噬菌体载体，通过噬菌斑印迹筛选抗体的抗体库技术。3种构建策略所获得的大容量抗 体库：天然库、半合成库及全合成库均取得成功，使不经免疫制备抗体成为现实， 2.噬菌体抗体库技术 噬菌体抗体库的表达载体可分为λ噬菌体(phageλ)、单链丝状噬菌体(filamentous phage)及噬菌粒(phagemid)三种系统。这三种系统各有其利弊。将肽链通过与单链 噬菌体外壳蛋白融合表达在单链噬菌体的表面。利用其可以再扩增的特性，将靶分子固 相化，通过亲和吸附一洗脱一扩增，可筛选到靶分子的配体肽链。可经突变和链置换方 法改进抗体亲和力，最终获得高亲和力的特异性抗体。 着重介绍噬菌粒系统介绍基于噬菌体gIII和gVⅢ蛋白的不同载体可以筛选出不同亲和 力的抗体基因。 3.大容量抗体库 大容量抗体库的构建技术在不断完善，通过反复连接、转化所获抗体库的容量可达 到10°。 4.抗体库技术的应用 噬菌体抗体库的突出用途有二个：一是解决了人源抗体的制备难题，可通过噬菌体 抗体库或大容量抗体库制备人单抗，也可用抗体库技术进行鼠单抗人源化。二是抗体库 技术使抗体性能的改良进入了新的阶段：可以筛选具有特定性能的未知结构，如优化抗 体的结构、提高抗体的表达量、改善抗体的特异性等，尤其是利用抗体库技术在体外进 包括抗体和生物大分子和化学分子鳌合形成具有特殊功能的分子导弹以及包括含 Fv 段的融合蛋白和 Fc 段的融合蛋白，前者主要用于免疫靶向，将选择的生物学活性靶 向至特定的部位，也可用于免疫桥连或构建嵌合受体。后者称为免疫粘附素，在科学研 究和临床治疗中均有应用价值。 三、学习重点和难点 重点：各种基因工程抗体的基本概念及应用； 难点：鼠单抗人源化的基本方法。 四、教学方法 课堂讲授 9 学时。 第六章 抗体库技术 一、目的和要求 掌握噬菌体抗体库制备及筛选的基本技术；熟悉大容量抗体库的概念与类型；了解 抗体库技术的主要应用方向。 二、主要内容 ⒈ 抗体库的技术基础和基本内涵 抗体库技术是 90 年代抗体工程领域的重大进展，它的出现有赖于 PCR 技术的建立、 抗体分子在大肠杆菌的功能性表达以及噬菌体展示技术的发展。初期的抗体库是利用λ 噬菌体载体，通过噬菌斑印迹筛选抗体的抗体库技术。 3 种构建策略所获得的大容量抗 体库：天然库、半合成库及全合成库均取得成功，使不经免疫制备抗体成为现实。 ⒉ 噬菌体抗体库技术 噬菌体抗体库的表达载体可分为λ噬菌体（phage λ）、单链丝状噬菌体（filamentous phage）及噬菌粒（phagemid）三种系统。这三种系统各有其利弊。将肽链通过与单链 噬菌体外壳蛋白融合表达在单链噬菌体的表面。利用其可以再扩增的特性，将靶分子固 相化，通过亲和吸附—洗脱—扩增，可筛选到靶分子的配体肽链。可经突变和链置换方 法改进抗体亲和力，最终获得高亲和力的特异性抗体。 着重介绍噬菌粒系统介绍基于噬菌体 gIII 和 gVIII 蛋白的不同载体可以筛选出不同亲和 力的抗体基因。 ⒊ 大容量抗体库 大容量抗体库的构建技术在不断完善，通过反复连接、转化所获抗体库的容量可达 到 10 10。 ⒋ 抗体库技术的应用 噬菌体抗体库的突出用途有二个：一是解决了人源抗体的制备难题，可通过噬菌体 抗体库或大容量抗体库制备人单抗，也可用抗体库技术进行鼠单抗人源化。二是抗体库 技术使抗体性能的改良进入了新的阶段：可以筛选具有特定性能的未知结构，如优化抗 体的结构、提高抗体的表达量、改善抗体的特异性等，尤其是利用抗体库技术在体外进