◆根据载体和方法的不同,有凝胶包埋法、半透膜包埋法两种 ①凝胶包埋法:利用各种多孔凝胶为载体将动物细胞固定化。细胞被固定在凝胶的微孔 中生长繁殖和新陈代谢,由于有载体的保护,动物细胞有较好的稳定性,可显著提高其存活 率。 用于动物细胞固定化的凝胶载体主要有琼脂糖凝胶、海藻酸钙凝胶和血纤维蛋白等 ②半透膜包埋法:利用高分子聚合物形成的半透膜将动物细胞包埋,形成微囊型固定化 动物细胞。 24.3固定化动物细胞的应用 动物细胞中大部分为贴壁细胞,需要貼附在载体的表面才能正常生长。所以固定化动物 细胞广泛应用。特别是采用微载体对动物细胞进行吸附固定化 3原生质体固定化 ◆固定化原生质体的制备主要包括原生质体的制备和原生质体固定化两个阶段。 31原生质体的制备 ◆不同种类的细胞,由于各自细胞壁的组成、结构和性质不同,原生质体的制备方法也 不一样。 ◆原生质体的制备过程是首先将对数生长期的细胞收集起来,悬浮在含有渗透压稳定剂 的高渗缓冲液中。然后加入适宜的细胞壁水解酶,在一定的条件下作用一段时间,使细胞壁 破坏。分离除去细胞壁碎片、未作用的细胞以及细胞壁水解酶,而得到原生质体 ◆除去细胞壁所使用的酶应根据细胞壁的主要成分的不同而进行选择。 细菌的细胞壁主要成分是肽多糖,所以细菌原生质体制备时主要采用从蛋清中得到的 溶菌酶; ◇酵母细胞壁主要由β葡聚糖构成,故采用β-1,3-葡聚糖酶8 ◆根据载体和方法的不同，有凝胶包埋法、半透膜包埋法两种。 ①凝胶包埋法：利用各种多孔凝胶为载体将动物细胞固定化。细胞被固定在凝胶的微孔 中生长繁殖和新陈代谢，由于有载体的保护，动物细胞有较好的稳定性，可显著提高其存活 率。 用于动物细胞固定化的凝胶载体主要有琼脂糖凝胶、海藻酸钙凝胶和血纤维蛋白等。 ②半透膜包埋法：利用高分子聚合物形成的半透膜将动物细胞包埋，形成微囊型固定化 动物细胞。 2.4.3 固定化动物细胞的应用： 动物细胞中大部分为贴壁细胞，需要貼附在载体的表面才能正常生长。所以固定化动物 细胞广泛应用。特别是采用微载体对动物细胞进行吸附固定化。 3.原生质体固定化 ◆固定化原生质体的制备主要包括原生质体的制备和原生质体固定化两个阶段。 3.1 原生质体的制备 ◆不同种类的细胞，由于各自细胞壁的组成、结构和性质不同，原生质体的制备方法也 不一样。 ◆原生质体的制备过程是首先将对数生长期的细胞收集起来，悬浮在含有渗透压稳定剂 的高渗缓冲液中。然后加入适宜的细胞壁水解酶，在一定的条件下作用一段时间，使细胞壁 破坏。分离除去细胞壁碎片、未作用的细胞以及细胞壁水解酶，而得到原生质体。 ◆除去细胞壁所使用的酶应根据细胞壁的主要成分的不同而进行选择。 ◇细菌的细胞壁主要成分是肽多糖，所以细菌原生质体制备时主要采用从蛋清中得到的 溶菌酶； ◇酵母细胞壁主要由β-葡聚糖构成，故采用β-1，3-葡聚糖酶；