第一碱变性法提取质粒的基本原理 在pH12.0-12.6碱性环境中，线性的大分子量细菌染色体 DNA变性分开，而共价闭环质粒DNA仍缠绕在一起。 ■将PH调至中性并有高盐浓度存在的条件下，染色体DNA之 间交联形成不溶性网状结构，大部分DNA和蛋白质在去污 剂SDS的作用下形成沉淀，而质粒DNA恢复为可溶状态， 通过离心可除去大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋 白质，质粒DNA尚在上清中，再用酚氯仿抽提进一步纯化 质粒DNA。 第一 碱变性法提取质粒的基本原理 ▪ 在pH12.0-12.6碱性环境中，线性的大分子量细菌染色体 DNA变性分开，而共价闭环质粒DNA仍缠绕在一起。 ▪ 将PH调至中性并有高盐浓度存在的条件下，染色体DNA之 间交联形成不溶性网状结构，大部分DNA和蛋白质在去污 剂SDS的作用下形成沉淀，而质粒DNA恢复为可溶状态， 通过离心可除去大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋 白质，质粒DNA尚在上清中，再用酚氯仿抽提进一步纯化 质粒DNA