实验七品种真实性的SSR分子标记分析 一、目的要求 (①)通过实验操作或现场参观了解品种真实性SSR分子标记分析的基本仪器设备、引物 和步骤。 (②)学会从紫外光观察识别分子标记电泳图谱或照片图谱，能识别和判断品种图谱的差 异。 二、材料用具 1.试材种子或幼苗 2.用具离心机、离心管、紫外分光光度计、微量移液器、吸头、吸水纸、水浴锅、 冰箱、研体、液氨能、电子天平、州计、高压灭菌锅、一次性手套和口罩、电泳仪及电泳 槽、PCR仪、各种规格的微量移液器及吸管、PCR管及管架、L.5L离心管及管架、记号笔、 磁力搅拌器、三角瓶、紫外透射仪及凝胶成像系统等。 3.试剂 三经甲基氨基甲烷们(Tris),CTAB,十二烷基硫酸钠(SDS),乙二胺四乙酸二钠盐 (DT),HCI,硼酸，氯化钠，氧化纳，硫基乙醉OE),无水乙醇，氯仿，异丙醇，异戊醇 饱和酚，RnaseA,5 X PCR Buffer:80mol/L(NH)S04,335mo/1Tris-HCIph8.8), MgC12(25mol/1,dNTP(1.25mol/1),Taq酶(5U/1),SSR引物，溴化乙锭 4.溶液配制 1)1M Tris-HCI (PH8.0) 称取Tris30.275g溶于200ml水，用浓HCI调PH至8.0，降到室温后，定溶至250ml, 高压灭菌，4℃保存。 2)0.5MDTA(PH8.0) 称取EDTA18.61g溶于80ml水，磁力搅拌器搅拌，用a0H调PH至8.0，定溶至100 ml,高压灭菌，4℃保存。 3)2X Extracation Buffer 100ML 2%CTAB 2.0g 100mM Tris-HCI(PH8.0) 10 ml IM Tris-HCI(PH8.0) 20 mM EDTA (PH8.0) 4ml 0.5M EDTA(PH8.0) 1.4 M NaCI 8.186g 实验七 品种真实性的 SSR 分子标记分析 一、目的要求 (1)通过实验操作或现场参观了解品种真实性 SSR 分子标记分析的基本仪器设备、引物 和步骤。 (2)学会从紫外光观察识别分子标记电泳图谱或照片图谱，能识别和判断品种图谱的差 异。 二、材料用具 1．试材 种子或幼苗 2．用具 离心机、离心管、紫外分光光度计、微量移液器、吸头、吸水纸、水浴锅、 冰箱、研钵、液氮罐、电子天平、pH 计、高压灭菌锅、一次性手套和口罩、电泳仪及电泳 槽、PCR 仪、各种规格的微量移液器及吸管、PCR 管及管架、1.5 mL 离心管及管架、记号笔、 磁力搅拌器、三角瓶、紫外透射仪及凝胶成像系统等。 3．试剂 三经甲基氨基甲烷们(Tris)，CTAB，十二烷基硫酸钠(SDS)，乙二胺四乙酸二钠盐 (EDTA)，HCl，硼酸，氯化钠，氧化纳，硫基乙醉(ME)，无水乙醇，氯仿，异丙醇，异戊醇， 饱和酚，RnaseA， 5 X PCR Buffer：80mmol/L（NH4）SO4，335mmo/l Tris-HCIph8.8）， MgC12(25mmol/l， dNTP(1.25nmol/l)，Taq 酶（5U/ul），SSR 引物，溴化乙锭 4. 溶液配制 1）1M Tris-HCI(PH8.0) 称取 Tris 30.275g 溶于 200 ml 水，用浓 HCI 调 PH 至 8.0，降到室温后，定溶至 250ml， 高压灭菌，4℃保存。 2）0.5 M EDTA(PH8.0) 称取 EDTA 18.61g 溶于 80 ml 水，磁力搅拌器搅拌，用 NaOH 调 PH 至 8.0，定溶至 100 ml，高压灭菌，4℃保存。 3）2X Extracation Buffer 100ML 2%CTAB 2.0g 100mM Tris-HCI(PH8.0) 10 ml 1M Tris-HCI(PH8.0) 20 mM EDTA(PH8.0) 4ml 0.5M EDTA(PH8.0) 1.4 M NaCI 8.186g