人工粘性末端的连接5‘突出末端 5" G 5 AATTC ECoR I 5 GATCC G BamH I CTTAA 5 5 G CCTAG 5 Klenow 补平 Klenow 补平 GAATT 5 AATTC 5'GATCC GGATC CTTAA 5 TTAAG CTAGG CCTAG 5 TdT dGTP TdT dcTP GAATTGGGGGG AATTC GATCC GGATCCCCCCC CTTAA GGGGGGTTAAG CCCCCCCTAGG CCTAG 退火 T4-DNA ligase BamHI BamH I 5 GAATTGGGGGGGATCC GGATCCCCCCCAATTC CTTAACCCCCCCTAGG CCTAGGGGGGGTTAAG 5" GAATTGGGGGGGATCC GGATCCCCCCCAATTC CTTAACCCCCCCTAGG CCTAGGGGGGGTTAAG人工粘性末端的连接 5‘突出末端 5' G CCTAG GATCC G 5' G 5' CTTAA 5' 5' 5' AATTC G T4-DNA ligase 5' 5' Klenow 补平 Klenow 补平 5' GGATC CCTAG 5' GATCC CTAGG 5' GAATT CTTAA 5' 5' 5' AATTC TTAAG TdT dGTP TdT dCTP GAATTGGGGGG CTTAA AATTC GGGGGGTTAAG GGATCCCCCCC CCTAG GATCC CCCCCCCTAGG GAATTGGGGGGGATCC CTTAACCCCCCCTAGG GGATCCCCCCCAATTC CCTAGGGGGGGTTAAG 5' 5' GAATTGGGGGGGATCC CTTAACCCCCCCTAGG GGATCCCCCCCAATTC CCTAGGGGGGGTTAAG 退火 BamH I EcoR I BamH I BamH I